高通量测序解析肿瘤患者MET突变谱及靶向用药免疫组化筛查的价值

摘要

【目的】研究MET基因在肿瘤患者中的突变状态，重点分析其在肺癌组织中的表达情况及对患者预后的影响，为肿瘤的精准诊疗提供理论依据和潜在靶点。【方法】收集2021年1月至2025年9月期间的1 627例肿瘤患者样本，运用高通量测序技术对筛选出的137例存在MET突变的肿瘤患者进行DNA水平的基因检测。分析突变位点在外显子和内含子的分布情况，以及MET基因扩增和基因融合的发生频率，重点关注各外显子的突变频率及高频变异类型。采用免疫组化方法，对137例患者肿瘤组织中的c-MET蛋白表达水平进行染色分析，针对9例MET基因14号外显子跳跃突变患者的肿瘤组织进行免疫组化分析，以研究c-MET蛋白表达与该特定突变类型之间的关联。利用GEPIA2数据库和TCGA数据库中肺癌的RNA测序结果、免疫组化染色数据及随访预后等信息进行综合分析，探讨MET基因在肿瘤组织中的表达与患者预后之间的潜在联系。【结果】在1 627例肿瘤患者中共筛选出137例MET突变患者，男性93例，平均年龄（66.85±9.61）岁，女性44例，平均年龄（59.43±11.08）岁。肿瘤类型以肺癌居多（117例）。MET基因在乳腺癌、多形性胶质母细胞瘤等肿瘤中表达低于正常组织，在肺癌、肠癌中则相反。生存分析显示，肺腺癌中MET基因高表达患者整体生存时间低于低表达患者。利用二代测序共检测到961条突变信息，其中外显子突变547条，内含子突变374条，MET基因扩增13例，基因融合27例。2号外显子突变频率最高，其次为5号、4号、19号外显子等。高频变异类型包括exon4上的c.2890C>A(p.L964M)、exon5上的c.3028G>T(p.D1010Y)等。c-MET蛋白表达与基因突变类型相关，错义突变多使c-MET蛋白呈阳性或强阳性表达，无义突变则多表现为c-MET蛋白表达较弱或缺失。在9例MET基因14号外显子跳跃突变患者中，c-MET蛋白表达评分多为0～1分，仅1例为2分。117例肺癌患者中，男性发病率高于女性，Ⅲ～Ⅳ期患者多于Ⅰ～Ⅱ期。41例患者选择手术+靶向药物（谷美替尼、赛沃替尼）治疗，随访发现8例复发或转移。【结论】MET基因突变在不同肿瘤类型中呈现出特异性的突变特征，其表达水平在多种肿瘤组织与正常组织间存在显著差异，并且与肺腺癌患者的不良预后密切相关。c-MET蛋白表达与MET基因突变类型紧密相关，尤其在MET基因14号外显子跳跃突变患者中呈现出特征性表达模式，这为临床利用免疫组化进行初步筛选提供了重要依据。

关键词

肿瘤 / MET基因突变 / 肺癌 / 临床病理特征 / 14号外显子跳跃突变

基金资助

湖南省自然科学基金（2025JJ60591）; 湖南省人民医院青年博士基金（暨2023年国自培育项目；BSJJ202218）; 广西医疗卫生适宜技术开发与推广应用项目（S2020112）