CD8⁺T细胞与活化的肝星状细胞在门静脉癌栓中的关键配体-受体轴驱动基质激活和T细胞重编程

摘要

【目的】鉴定可能有助于优化伴门静脉癌栓（PVTT）肝细胞癌免疫治疗策略的关键配体-受体作用轴。【方法】从基因表达综合数据库（GEO）下载正常组织（Norm）和PVTT组织的单细胞转录组测序数据，并进行整合分析与细胞注释。采用CellChat推断细胞间通讯网络并比较信号通路活性，从而筛选差异显著的候选配体-受体作用轴。随后，利用多重免疫荧光（mIF）在组织水平评估候选作用轴相关信号的空间分布特征。在细胞水平上，进一步通过qPCR和流式细胞术检测外周血来源CD8⁺T细胞及人肝星状细胞系LX-2中关键配体和受体的表达情况。最后，结合重组蛋白刺激以及拮抗剂或中和阻断实验，对其功能效应进行体外验证。【结果】分析结果显示，在PVTT中，CD8⁺T细胞与活化肝星状细胞（aHSCs）之间存在显著的双向通讯。由CD8⁺T细胞指向aHSCs的通讯中，SPP1-CD44轴最为突出；而在相反方向上，MIF-（CD74+CD44）轴获得了较强支持。上述两条作用轴均在生物信息学筛选、组织空间定位分析以及细胞与功能实验验证中得到一致支持。【结论】SPP1-CD44轴和MIF-（CD74+CD44）轴可能通过促进间质活化及诱导T细胞功能重塑，共同参与塑造PVTT的免疫抑制性肿瘤微环境（ITME），并有望成为提高PVTT患者免疫治疗应答的潜在干预靶点。

关键词

门静脉癌栓 / 肿瘤微环境 / 细胞间通讯 / CD8⁺T细胞 / 激活态肝星状细胞

基金资助

广东基础与应用基础研究基金（2023A1515011803,2022A1515010547）