酵母醇脱氢酶提纯教学实验的优化

顾华杰; 缪天; 刘恒蔚; 陈宏伟; 郭伟强; 王桃云

实验科学与技术 ›› 2025, Vol. 23 ›› Issue (04) : 25 -32.

酵母醇脱氢酶提纯教学实验的优化

顾华杰, 缪天, 刘恒蔚, 陈宏伟, 郭伟强, 王桃云

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摘要

针对酵母醇脱氢酶提纯教学实验中存在的问题，为了获得高纯度、高活性、高回收率的酵母醇脱氢酶蛋白，该文应用单因素实验法对热浸提法、热变性沉淀法、有机溶剂沉淀法分离纯化酶蛋白进行优化，从而提高酵母醇脱氢酶蛋白的提纯效率。结果显示当料液比为1∶6、粗提温度为25℃、粗提时间为1.5 h，热变性温度为65℃、时间为15 min，有机溶剂沉淀剂为乙醇、沉淀杂蛋白加入比例为上清液0.5倍，沉淀酶蛋白加入比例为上清液0.45倍时，分离纯化效果最好。通过上述条件的优化，提高了教学实验效果，也有助于锻炼学生的实际动手能力、创新思维和科研能力。