IL-37抑制恶性黑色素瘤转移的体内研究

摘要

目的：恶性黑色素瘤恶性程度极高，早期即可发生转移，预后极差，严重威胁着人类的健康，研究抑制其转移相关的分子及机制对其治疗及预后有重要意义。白细胞介素(interleukin,IL)-37作为抗炎细胞因子，不仅与多种炎症性疾病有关，还具有抗肿瘤作用。本研究旨在通过建立恶性黑色素瘤肺转移小鼠模型，研究IL-37对小鼠体内恶性黑色素瘤转移的作用。方法：将IL-37过表达(IL-37 overexpression,IL-37 oe)和Vector质粒分别转染小鼠黑色素瘤细胞B16F1，设置IL-37 oe组(加入转染试剂及IL-37 oe质粒)、空白对照(Blank)组(只加入转染试剂)和Vector组(加入转染试剂及Vector质粒)。C57小鼠随机分为3组，每组3只。分别收集处于对数生长期的Blank组、Vector组和IL-37 oe组B16F1细胞在无菌条件下进行小鼠尾静脉注射。每3天称量并记录小鼠体重。1个月后，采用颈椎脱臼法处死小鼠，分别解剖并分离各组小鼠肺器官及心、肝、脾、肾等脏器，肺器官采图并记录转移结节数；小鼠心、肝、脾、肾等各脏器组织用4%的多聚甲醛固定后制作石蜡切片，并进行苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色。结果：蛋白质印迹显示质粒构建成功。第1、4、7、10、13、16、19、22、25和28天，IL-37 oe组小鼠体重较Blank组和Vector组差异均无统计学意义(均P>0.05)。解剖小鼠肺器官发现肺部肿瘤结节，表明建模成功。HE染色发现IL-37 oe组小鼠心、肝、脾、肾等脏器组织形态学变化较Blank组和Vector组均无明显差异。3组小鼠的肺组织中，Blank组肺转移的结节数为(24.00±2.08)个，Vector组肺转移的结节数为(24.67±0.88)个，IL-37 oe组为(5.33±1.45)个；IL-37 oe组肺部的转移结节数目明显低于Blank组和Vector组(均P<0.05)，而Blank组和Vector组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论：IL-37在小鼠体内能抑制恶性黑色素瘤细胞肺转移结节数，且对小鼠体重及其他脏器无明显影响，有望成为恶性黑色素瘤基因治疗或免疫治疗的潜在分子靶标。

关键词

恶性黑色素瘤 / 白细胞介素-37 / 转移 / B16F1细胞 / 过表达质粒