FTO通过调控pri-miR-139的m⁶A修饰抑制乳头状甲状腺癌转移

摘要

目的：低风险微小乳头状甲状腺癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）的检出增加与过度诊断和治疗有关。N⁶-甲基腺苷（N⁶-methyladenosine,m⁶A）修饰导致的微RNA（microRNAs,miRNA）失调在肿瘤转移和进展中发挥重要作用。然而，m⁶A靶向miRNAs在PTC中的功能仍不清楚。本研究旨在探究m⁶A-miR-139-5p在PTC中的表达调控机制，明确其与PTC转移的关联，并评估其作为PTC转移诊断生物标志物的潜力，为PTC的精准诊断和治疗提供实验依据。方法：通过癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas,TCGA）和GSE130512队列筛选与PTC转移相关的候选靶向m⁶A-miRNA分子。收集13例PTC转移患者和18例非转移患者的临床标本，检测m⁶A-miR-139-5p的表达水平，分析其与转移的相关性。通过实验探究脂肪质量和肥胖相关蛋白（fat mass and obesity-associated protein,FTO）对pri-miR-139甲基化水平及加工过程的影响，明确其对miR-139-5p表达的调控作用。在TPC-1细胞中，通过四甲基偶氮唑盐（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）实验检测miR-139-5p过表达对FTO过表达介导的细胞增殖的影响。通过细胞侵袭实验验证miR-139-5p对PTC细胞侵袭能力的作用，并探究其是否通过靶向ZEB1/E-钙黏蛋白轴发挥功能。结果：通过比较TCGA和GSE130512队列，发现血清循环m⁶A-miR-139-5p可作为检测PTC转移的生物指标。对13例转移和18例非转移临床标本的检测表明，FTO通过降低其甲基化水平抑制pri-miR-139的加工，导致miR-139-5p在PTC中表达失调（P<0.05）。在TPC-1细胞中，MTT实验显示miR-139-5p过表达可部分逆转FTO过表达介导的细胞增殖（P<0.05）。此外，miR-139-5p通过靶向ZEB1/E-钙黏蛋白轴抑制PTC细胞的侵袭能力，而FTO过表达可部分削弱这种抑制效应。结论：血清循环miR-139-5p可作为评估PTC转移的潜在标志物，FTO通过调控pri-miR-139的m⁶A修饰影响miR-139-5的表达及功能，但其临床价值需进一步验证。

关键词

乳头状甲状腺癌 / N⁶-甲基腺苷修饰 / m⁶A靶向微RNA / 脂肪质量和肥胖相关蛋白 / 生物信息学分析 / 血清循环微RNA