氧化槐果碱抑制Nrf2/HO-1/NQO1通路诱导乳腺癌细胞凋亡

摘要

目的 探究氧化槐果碱通过调节核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/血红素氧合酶1(heme oxygenase-1, HO-1)/醌氧化还原酶1[NAD(P) H:quinone oxidoreductase1, NQO1]通路对乳腺癌(breast cancer, BC)细胞增殖、凋亡及氧化应激的影响。方法 使用MDA-MB-231和MCF-7细胞系。通过CCK-8检测细胞活性;定量实时聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction, q RT-PCR)和蛋白质印迹检测增殖(Survivin, Ki67, P21)、凋亡(cleaved caspase-3/9,Bax/Bcl-2)及Nrf2/HO-1/NQO1通路相关分子表达;流式细胞术分析凋亡及线粒体膜电位;酶联免疫吸附检测(ELISA)测定氧化应激指标超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)。在MDA-MB-231细胞中过表达Nrf2验证通路作用。建立裸鼠移植瘤模型评估肿瘤生长、 Ki67表达、 caspase-3阳性率、凋亡率(TUNEL)及Nrf2/HO-1/NQO1通路蛋白质表达。结果 氧化槐果碱剂量依赖性抑制BC细胞活性,诱导凋亡,降低线粒体膜电位。其显著抑制增殖相关分子(Survivin, Ki67)表达,促进凋亡相关分子(P21, cleaved caspase-3/9, Bax/Bcl-2比值)表达;同时抑制Nrf2/HO-1/NQO1通路活化,加剧氧化应激(降低SOD、 GSH,升高MDA)。过表达Nrf2可部分逆转氧化槐果碱的上述效应。动物实验证实氧化槐果碱抑制肿瘤生长、降低增殖(Ki67)、促进凋亡(caspase-3, TUNEL)并抑制体内Nrf2通路活化。结论 氧化槐果碱通过抑制Nrf2/HO-1/NQO1信号通路,有效抑制乳腺癌细胞增殖、诱导凋亡并增强氧化应激。

关键词

氧化槐果碱 / 乳腺癌 / 凋亡 / 氧化应激 / Nrf2/HO-1/NQO1信号通路