维生素D3介导TIPE2调控慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉中巨噬细胞的功能及表型

摘要

目的 探讨维生素D3 (vitamin D3, VD3)介导的肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样蛋白2 (tumor necrosis factor-alpha induced protein 8-like protein, TIPE2)对慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(chronic rhinosinusitis with nasal polyps, CRSw NP)中巨噬细胞功能和表型的调控作用。方法 收集新疆维吾尔自治区人民医院CRSw NP患者的外周血标本作为CRSw NP组,收集单纯鼻中隔偏曲需行手术治疗的患者外周血标本作为Control组, RT-qPCR和蛋白质印迹检测外周血中TIPE2和精氨酸酶-1 (Arg-1)的表达,化学发光法检测外周血中VD3浓度的分级变化。体外培养J774A. 1巨噬细胞,将J774A. 1巨噬细胞分为沉默TIPE2组(siTIPE2#2组)及其阴性对照组(si-NC组)、过表达TIPE2的阴性对照组(oe-NC组)、 oe-NC联合VD3治疗组(oe-NC+VD3组)、过表达TIPE2的重组载体(oe-TIPE2)联合VD3治疗组(oe-TIPE2+VD3组)。另外,建立CRSw NP小鼠模型,将CRSw NP小鼠分为空载体(empty vector)治疗组(CRSwNP+empty vector组)、 CRSw NP+oe-TIPE2组、 CRSw NP+oe-TIPE2+VD3组,收集各组小鼠的外周血并分离血清和巨噬细胞。RT-qPCR和蛋白质印迹检测巨噬细胞中TIPE2和Arg-1的表达。酶联免疫吸附测试(ELISA)法检测各组J774A. 1巨噬细胞培养物上清液以及小鼠血清中白细胞介素(IL)-4、 IL-13的水平。结果 与Control组比较, CRSw NP组中VD3分级降低,而TIPE2和Arg-1的表达水平及IL-4、 IL-13的血清浓度上调(P_均<0.05)。Arg-1和TIPE2的水平显著性正相关(r=0.994,P<0.01), Arg-1和TIPE2分别与VD3分级呈显著性负相关(r=-0.652,P<0.01;r=-0.745,P<0.01)。与si-NC组比, si-TIPE2#2组的Arg-1的表达水平及IL-4、 IL-13的浓度都降低(P_均<0.05)。与oe-NC组比, oe-NC+VD3组的TIPE2和Arg-1的表达水平及IL-4、 IL-13的浓度都降低(P_均<0.05)。而与oe-NC+VD3组比, oe-TIPE2+VD3组的TIPE2和Arg-1的表达水平及IL-4、 IL-13的浓度都增加(P_均<0.05)。与CRSw NP+empty vector组比, CRSw NP+oe-TIPE2组中TIPE2和Arg-1的表达水平升高, VD3的浓度降低, IL-4、 IL-13的血清浓度都增加(P_均<0.05)。与CRSw NP+oe-TIPE2组比, CRSw NP+oe-TIPE2+VD3组中TIPE2和Arg-1的表达水平降低, VD3的浓度升高, IL-4、 IL-13的血清浓度减少(P_均<0.05)。结论 VD3通过下调TIPE2的表达抑制CRSw NP中Arg-1、IL-4、 IL-13的表达。

关键词

慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉 / 维生素D3 / 巨噬细胞极化 / 肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样蛋白2 / 炎症反应