miR-107通过ITGA2促进肺动脉平滑肌细胞凋亡在肺动脉高压中的作用研究

摘要

目的 探究miR-107和整合素α2 （integrin alpha-2, ITGA2）对肺动脉平滑肌细胞的作用以及其在肺动脉高压（pulmonary arterial hypertension, PAH）中的影响及相关机制。方法 正常和低氧条件培养小鼠肺动脉平滑肌细胞（pulmonary artery smooth muscle cells, PASMC）, qRT-PCR检测细胞miR-107和ITGA2表达,流式细胞术检测细胞周期和凋亡。荧光素酶报告基因实验检测miR-107和ITGA2靶向性。将si-NC和si-miR-107转染至PASMC,低氧条件饲养并分组为:si-NC组和si-miR-107组,检测细胞miR-107和ITGA2表达、细胞周期和凋亡。将30只C57BL/6小鼠分为:对照组、模型组和si-miR-107治疗组。模型组和miR-107治疗组低氧诱导PAH模型后分别尾静脉注射si-NC和si-miR-107。检测小鼠右心室肥厚指数（right ventricular hypertrophy index, RVHI）、右心室收缩压（right ventricular systolic pressure, RVSP）和平均肺动脉压（mean pulmonary artery pressure, mPAP）。qRT-PCR和蛋白质印迹检测小鼠肺组织miR-107和ITGA2表达,以及小鼠肺组织磷酸化组蛋白H2AX （phosphorylated histone H2AX, γH2AX）表达。结果 细胞实验中,与正常组比较,低氧组细胞中miR-107表达升高, ITGA2表达降低,细胞G₁期比例升高, S期比例降低,细胞凋亡率升高。miR-107靶向ITGA2。与si-NC组比较, si-miR-107组细胞中miR-107表达降低,ITGA2表达升高,细胞G₁期比例降低, S期比例升高,细胞凋亡率降低。小鼠实验中,与对照组相比,模型组小鼠RVHI、 RVSP和mPAP升高, miR-107表达升高, ITGA2表达降低, γH2AX蛋白表达升高。与模型组相比, si-miR-107治疗组小鼠RVHI、 RVSP和mPAP降低, miR-107表达降低, ITGA2表达升高,γH2AX蛋白表达降低。结论 miR-107通过ITGA2抑制肺动脉平滑肌细胞周期进展,促进细胞凋亡,从而影响PAH进展。

关键词

肺动脉平滑肌细胞 / 肺动脉高压 / miR-107 / 整合素α2