lncRNA PSMA3-AS1靶向miR-3619-5p调控宫颈癌SiHa细胞增殖、迁移及侵袭的分子机制研究

摘要

目的 探讨lncRNA PSMA3-AS1调控宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭的分子机制。方法 收集2020年3月至2021年6月西安医学院第二附属医院收治的42例宫颈癌患者的癌组织及其癌旁组织标本,采用qRT-PCR法检测宫颈癌组织、癌旁组织、人宫颈上皮永生化细胞H8、与人宫颈癌细胞系SiHa、HeLa、Caski中lncRNA PSMA3-AS1、miR-3619-5p的表达量;以SiHa细胞为研究对象,分组为:si-NC组、si-lncRNA PSMA3-AS1组、miR-NC组、miR-3619-5p组、anti-miR-NC+si-lncRNA PSMA3-AS1组、anti-miR-3619-5p+si-lncRNA PSMA3-AS1组;MTT法与Transwells实验分别检测每组SiHa细胞的增殖活力、迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告实验检测miR-3619-5p过表达对野生型载体lncRNA PSMA3-AS1-WT、突变型载体lncRNA PSMA3-AS1-MUT荧光素酶活性的影响;Western印迹检测MMP2、MMP9蛋白表达量。结果 宫颈癌组织中lncRNA PSMA3-AS1的表达量比癌旁组织增加(P<0.01),miR-3619-5p的表达量比癌旁组织减少(P<0.01);与H8细胞比较,SiHa、HeLa、Caski细胞中lncRNA PSMA3-AS1的表达量升高(P<0.01),miR-3619-5p的表达量降低(P<0.01);与si-NC组比较,si-lncRNA PSMA3-AS1组细胞活力和MMP2、MMP9蛋白水平降低(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-3619-5p组细胞活力和MMP2、MMP9蛋白水平降低(P<0.01),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05);miR-3619-5p过表达可抑制lncRNA PSMA3-AS1-WT的荧光素酶活性(P<0.01),而未能影响lncRNA PSMA3-AS1-MUT的荧光素酶活性;与anti-miR-NC+si-lncRNA PSMA3-AS1组比较,anti-miR-3619-5p+si-lncRNA PSMA3-AS1组细胞活力和MMP2、MMP9蛋白水平升高(P<0.01),迁移及侵袭细胞数增多(P<0.01)。结论 干扰lncRNA PSMA3-AS1表达可通过促进miR-3619-5p而降低宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭能力。

关键词

宫颈癌 / 增殖 / 迁移 / 侵袭 / lncRNA PSMA3-AS1 / miR-3619-5p