沉默HOXA11-AS靶向miR-766-3p对ox-LDL诱导的血管内皮细胞损伤的影响

摘要

目的 探讨长链非编码RNA (lncRNA)同源异形盒基因A11反义RNA (HOXA11-AS)靶向微小RNA-766-3p (miR-766-3p)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管内皮细胞损伤的影响。方法 以100μg/mL的ox-LDL处理人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC) 24 h建立细胞损伤模型。将HUVEC分为对照(con)组、ox-LDL组、ox-LDL+si-NC组、ox-LDL+si-HOXA11-AS组、ox-LDL+miR-NC组、ox-LDL+miR-766-3p组、ox-LDL+si-HOXA11-AS+anti-miR-NC组、ox-LDL+si-HOXA11-AS+anti-miR-766-3p组。RT-qPCR检测HOXA11-AS和miR-766-3p表达。流式细胞术分析细胞凋亡。试剂盒检测LDH释放量、胞内SOD活性。ELISA法检测培养液中TNF-α、IL-1β水平。双荧光素酶报告实验确定HOXA11-AS和miR-766-3p的靶向关系。结果 与con组比较,ox-LDL组HUVEC细胞凋亡率、LDH释放量、HOXA11-AS表达量以及培养液中TNF-α、IL-1β水平显著升高(P<0.05),SOD活性、miR-766-3p表达量显著降低(P<0.05)。与ox-LDL+si-NC组比较,ox-LDL+si-HOXA11-AS组HUVEC细胞凋亡率、LDH释放量以及培养液中TNF-α、IL-1β水平显著降低(P<0.05),SOD活性显著升高(P<0.05)。与ox-LDL+miR-NC组比较,ox-LDL+miR-766-3p组HUVEC细胞凋亡率、LDH释放量以及培养液中TNF-α、IL-1B水平显著降低(P<0.05),SOD活性显著升高(P<0.05)。miR-766-3p是HOXA11-AS的直接靶点。与ox-LDL+si-HOXA11-AS+anti-miR-NC组比较,ox-LDL+si-HOXA11-AS+anti-miR-766-3p组HUVEC细胞凋亡率、LDH释放量以及培养液中TNF-α、IL-1β水平显著升高(P<0.05),SOD活性显著降低(P<0.05)。结论 沉默HOXA11-AS通过靶向上调miR-766-3p表达能够抑制ox-LDL诱导的血管内皮细胞凋亡、氧化应激和炎性反应。

关键词

血管内皮细胞 / 氧化低密度脂蛋白 / HOXA11-AS / miR-766-3p / 凋亡 / 氧化应激 / 炎症