circ＿0061140靶向miR-6838-5p促进非小细胞肺癌细胞的增殖、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡

摘要

目的 通过实验研究确认环状RNA （circRNA） circ＿0061140是否能靶向miR-6838-5p调控非小细胞肺癌细胞的增殖、细胞周期和凋亡。方法 采用逆转录-定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测circ—0061 140和miR-6838-5p在非小细胞肺癌细胞中的表达情况。将非小细胞肺癌NCI-H1299细胞分为si-circ—0061140组（转染si-circ₀061 140;低表达circ₀061 140）、si-NC组（转染si-NC;阴性对照）、NC组（未转染;空白对照）、miR-6838-5p组（转染miR-6838-5p模拟物;高表达miR-6838-5p）、miR-NC组（转染miR-NC;高表达miR-6838-5p的阴性对照）、si-circ—0061140+anti-miR-NC组（共转染si-circ＿0061140与anti-miR-NC）、si-circ＿0061140+anti-miR-6838-5p组（共转染si-circ₀061 140与anti-miR-6838-5p）。采用Western印迹检测细胞周期蛋白D1 （cyclinD1）、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3 （cleavedcaspase-3）蛋白表达,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡情况。双荧光素酶活性检测circ＿0061140和miR-6838-5p的靶向结合。结果 非小细胞肺癌组织、细胞NCI-H1299、NCI-H2170、NCI-H1975中的circ—0061140表达量均比癌旁组织或正常肺上皮细胞BEAS-2B高,miR-6838-5p表达量比癌旁组织或BEAS-2B细胞低（P <0.05）。si-circ 0061 140组或miR-6838-5p组NCI-H1299细胞的CyclinD1蛋白表达量、增殖能力、S期细胞比例比NC组减少,Cleaved-caspase-3蛋白表达量、G₀/G₁,期细胞比例、凋亡率比si-NC组或miR-NC组增加（P_均<0.05）。circ＿0061140靶向调控miR-6838-5p的表达。共转染si-circ＿0061140、anti-miR-6838-5p可减弱转染si-circ＿0061140对细胞生物学行为的作用。结论 低表达circ 0061140通过靶向非小细胞肺癌细胞的miR-6838-5p,抑制细胞增殖、阻滞G₀/G₁期细胞周期,并加速凋亡。

关键词

circ＿0061140 / 非小细胞肺癌 / miR-6838-5p / 细胞增殖 / 细胞周期 / 细胞凋亡