青蒿琥酯对牙髓干细胞成骨分化及AMPK/NF-κB信号通路的影响

摘要

目的 探讨青蒿琥酯(artesunate,Art)对牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)成骨分化及腺苷活化蛋白激酶(AMP-activated potein kinase,AMPK)/核因子-κB (nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路的影响。方法 分离并鉴定DPSCs,成骨及成脂分化诱导评估多向分化潜能。使用不同浓度的青蒿琥酯处理DPSCs细胞,细胞计数试剂(cell counting Kit-8,CCK-8)法检测细胞增殖活性;将DPSCs细胞分为对照组(control)、青蒿琥酯低浓度组(Art-L)、青蒿琥酯中浓度组(Art-M)、青蒿琥酯高浓度组(Art-H),碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)染色及茜素红S染色检测细胞ALP活性及细胞矿化结节;Western印迹法检测细胞骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)及AMPK/NF-κB通路相关蛋白表达水平。结果 成功分离DPSCs细胞,经鉴定具有多向分化潜能;与Control组比较,使用浓度为3.125、6.25、12.5μmol/L的Art处理DPSCs细胞后,细胞ALP活性水平、矿化结节数、OPN、RUNX2、OCN、p-AMPK蛋白表达水平显著升高(P<0.05),p-NF-κB P65蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论 青蒿琥酯可促进牙髓干细胞成骨分化,可能与调控AMPK/NF-κB信号通路有关。

关键词

青蒿琥酯 / 牙髓干细胞 / AMPK/NF-κB信号通路 / 成骨分化