circVAPA/miR-377-3p/ZEB2轴对乳腺癌紫杉醇耐药的调控作用

摘要

目的 研究环状RNA囊泡相关膜蛋白相关蛋白A(vesicle-associated membrane protein-associated protein A, circ VAPA)靶向miR-377-3p调控锌指E盒结合同源框2(Zinc-finger E-box binding homeobox 2,ZEB2)在乳腺癌紫杉醇耐药中的作用。方法 培养人乳腺癌细胞株MCF7及其紫杉醇耐药株MCF7/Taxol,检测其中circVAPA、 miR-377-3p、 ZEB2的表达。MCF7/Taxol细胞分为对照组、阴性对照(NC)组、 si-circVAPA组、 miR-377-3p模拟物组、 miR-377-3p抑制物组、 si-circVAPA+miR-377-3p抑制物组、对照质粒组、 circVAPA组、 circVAPA+miR-377-3p组。采用双荧光素酶报告基因实验检测circVAPA靶向miR-377-3p、 miR-377-3p靶向ZEB2的情况,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率并评估紫杉醇敏感性。结果 MCF7/Taxol细胞中circVAPA、 ZEB2的表达水平高于MCF7细胞, miR-377-3p的表达水平低于MCF7细胞(P<0.05)。miR-377-3p模拟物组MCF7/Taxol细胞中circVAPA和ZEB2野生型报告基因的活性均低于NC组(P<0.05), circVAPA和ZEB2突变型报告基因的活性与NC组比较无显著差异(P> 0.05)。si-circVAPA组和miR-377-3p模拟物组MCF7/Taxol细胞的紫杉醇敏感性高于NC组(P<0.05), ZEB2的表达水平低于NC组(P<0.05)。circ VAPA组的紫杉醇敏感性低于对照质粒组, ZEB2的表达水平高于对照质粒组;circVAPA+miR-377-3p组的紫杉醇敏感性高于circVAPA组, ZEB2的表达水平低于circVAPA组(P<0.05)。si-circVAPA+miR-377-3p抑制物组MCF7/Taxol细胞的紫杉醇敏感性低于si-circVAPA组(P<0.05), ZEB2的表达水平高于si-circVAPA组(P<0.05)。结论 circVAPA靶向miR-377-3p调控ZEB2与乳腺癌细胞紫杉醇耐药相关。

关键词

乳腺癌 / 紫杉醇耐药 / 环状RNA囊泡相关膜蛋白相关蛋白A / miR-377-3p / 锌指E盒结合同源框2