LINC00319调控PENK调节PI3K/AKT信号通路在骨肉瘤中的机制研究

摘要

目的 探讨LINC00319调控前脑啡肽(proenkephalin, PENK)调节PI3K/AKT信号通路在骨肉瘤(osteosarcoma, OS)中的机制。方法 提取OS患者及非OS患者外周血RNA, q PCR法检测LINC00319及PENK表达水平,分析LINC00319与PENK相关性。在MG63细胞中敲低或过表达LINC00319, q PCR及蛋白质印迹法分别检测PENK的m RNA及蛋白表达。OS小鼠移植瘤模型分为sh NC组及sh LINC00319组,称量肿瘤重量,免疫组化实验检测肿瘤组织中PENK、 AKT、 p-AKT、 PI3K的表达。MG63细胞分为sh NC组、 sh LINC00319组、 sh LINC00319+sh PENK组, Ed U法检测细胞增殖, Transwell法检测细胞侵袭,蛋白质印迹法检测AKT、 p-AKT、 PI3K蛋白表达水平。结果 相较非OS患者, LINC00319在OS患者外周血高表达, PENK在OS患者外周血低表达, PENK与LINC00319表达呈负相关。敲低LINC00319后, PENK m RNA及蛋白水平上调,过表达LINC00319后, PENK m RNA及蛋白水平下调。相较于sh NC组, sh LINC00319组小鼠肿瘤重量降低,肿瘤组织中AKT蛋白表达水平不变, p-AKT蛋白表达水平降低, PI3K蛋白表达水平降低。相较于sh NC组MG63细胞, sh LINC00319组细胞增殖与侵袭能力降低, p-AKT、 PI3K蛋白表达水平下降;相较于sh LINC00319组细胞, sh LINC00319+sh PENK组细胞的增殖与侵袭能力以及p-AKT、 PI3K蛋白的表达水平均有所升高。结论 LINC00319在OS患者外周血高表达, PENK在OS患者外周血低表达,两者表达呈负相关性。LINC00319的高表达通过抑制PENK水平,进而激活PI3K/AKT信号通路促进OS细胞增殖及细胞侵袭。

关键词

骨肉瘤 / LINC00319 / PENK / PI3K/Akt