芒柄花黄素通过HNF4A抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭

摘要

目的 分析芒柄花黄素(formononetin, FORM)通过肝细胞核因子4α (hepatocyte nuclear factor4α, HNF4A)抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制。方法 使用不同浓度的芒柄花黄素处理EC109和KYSE510,利用CCK8检测细胞相对存活率和细胞的增殖,利用细胞克隆实验培养癌细胞,并检测加入芒柄花黄素前后细胞克隆数量,利用Transwell检测加入芒柄花黄素前后EC109和KYSE510细胞的迁移和侵袭。裸鼠皮下注射肿瘤细胞,加入芒柄花黄素,观察移植瘤体积和重量变化,并利用免疫组化检测移植瘤组织中Ki67蛋白表达。采用蛋白质印迹法检测芒柄花黄素对HNF4A基因表达的影响。构建稳定过表达HNF4A的EC109和KYSE510细胞系,加入芒柄花黄素,观察HNF4A的表达情况。结果 加入芒柄花黄素后, EC109和KYSE510的细胞相对存活率明显降低(P<0.05),与0μmol/L芒柄花黄素作用比较, EC109细胞系在芒柄花黄素浓度≥150μmol/L时,细胞相对存活率降低显著(P<0.05), KYSE510细胞系在芒柄花黄素浓度≥120μmol/L时,细胞相对存活率降低显著(P<0.05);芒柄花黄素组EC109和KYSE510增殖、侵袭、迁移的细胞数量均明显低于对照组(P<0.05)。移植瘤体积和重量明显低于对照组(P<0.05),Ki67蛋白表达明显低于对照组(P<0.05)。随着芒柄花黄素浓度越高、作用时间越久, HNF4A蛋白表达下调更为明显。HNF4A过表达可以恢复芒柄花黄素抑制的细胞增殖、侵袭和迁移(P<0.05)。结论 芒柄花黄素通过HNF4A抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭。

关键词

芒柄花黄素 / 食管癌细胞 / 增殖 / 侵袭 / 迁移