miR-592靶向调控PRDM5影响肾细胞癌侵袭转移及自噬的机制研究

摘要

目的 探究miR-592靶向调控PR结构域锌指蛋白5 (PR domain zinc finger protein 5, PRDM5影响肾细胞癌(renal cell carcinoma, RCC)侵袭转移及自噬的机制。方法 RT-qPCR、蛋白质印迹检测RCC组织和细胞中miR-592、 PRDM5 m RNA和蛋白水平。A498、 786-O细胞分为anti-miR-NC组、 anti-miR-592组、 anti-miR-592+si-NC组、 anti-miR-592+si-PRDM5组。RNA免疫共沉淀(RIP)检测miR-592和PRDM5的结合; CCK-8、 Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力;透射电镜观察自噬小体形成;蛋白质印迹检测细胞PRDM5、基质金属蛋白酶(MMP)-2、 MMP-9、 Beclin1、微管相关蛋白1轻链3 (LC3)Ⅱ/Ⅰ水平。建立移植瘤裸鼠模型,分析敲低miR-592表达对移植瘤生长的影响。结果 RCC组织和细胞中PRDM5 m RNA和蛋白水平降低, miR-592水平增加(P<0.05)。敲低miR-592表达后,细胞A450 nm、迁移和侵袭细胞数、 MMP-2、 MMP-9水平降低,自噬小体数量、 Beclin1、 LC3Ⅱ/Ⅰ水平增加(P<0.05)。敲低PRDM5表达能部分逆转敲低miR-592对细胞增殖、侵袭及自噬的影响(P<0.05)。敲低miR-592表达能够抑制裸鼠移植瘤生长(P<0.05)。结论 miR-592通过靶向抑制PRDM5表达,促进RCC细胞增殖、侵袭转移能力,并抑制自噬能力。

关键词

miR-592 / PR结构域锌指蛋白5 / 肾细胞癌 / 侵袭转移 / 自噬