黄芪多糖对人牙周膜干细胞生物学特性的影响

摘要

目的 探讨黄芪多糖通过调控微小RNA-375 (microRNA-375,miR-375)对人牙周膜干细胞生物学特性的影响及其相关机制的研究。方法 体外分离培养人牙周膜干细胞,采用黄芪多糖浓度为0、40、100、400μg/mL进行处理48 h,记为不同浓度的黄芪多糖组;将anti-miR-NC和anti-miR-375转染至人牙周膜干细胞,选取400μg/mL的黄芪多糖进行处理,记为黄芪多糖+anti-miR-NC组和黄芪多糖+anti-miR-375组。通过噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)检测细胞增殖能力和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Runt相关转录因子2 (runt-related transcription factor 2,Runx-2)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)和骨钙素(osteocalcin,OCN)的蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测miR-375的表达。结果 不同浓度的黄芪多糖组可以促进miR-375表达(1.54±0.16、1.92±0.20、2.54±0.22)(0.92±0.07)、细胞A值[(0.46±0.05、0.58±0.07、0.72±0.06)比(0.35±0.04),(0.53±0.05、0.69±0.07、0.84±0.09)(0.40±0.03)]、ALP活性(0.73±0.08、0.84±0.07、1.03±0.09)比(0.32±0.03),Runx-2(1.32±0.11、1.51±0.14、1.83±0.17)(0.92±0.07)、OCN (1.47±0.13、1.65±0.16、1.89±0.19)(0.99±0.06)、OPN (1.53±0.15、1.72±0.16、1.99±0.20)(1.00±0.04)蛋白表达上调。黄芪多糖+anti-miR-375组的miR-375的表达、细胞A值、ALP活性,Runx-2、OCN、OPN蛋白表达明显高于黄芪多糖+anti-miR-NC组。结论 黄芪多糖可以促进人牙周膜干细胞的增殖和成骨分化能力,其作用机制可能与miR-375有关。

关键词

黄芪多糖 / miR-375 / 人牙周膜干细胞 / 增殖 / 成骨分化