卡格列净通过PDGF/SIRT1减轻糖尿病肾病小鼠肾纤维化

摘要

目的 探讨卡格列净通过PDGF/SIRT1减轻糖尿病肾病小鼠肾纤维化的潜在机制。方法 使用链脲菌素(streptozotocin, STZ)建立糖尿病肾病小鼠模型,并设置以下组别:(1)对照小鼠;(2) STZ灌胃小鼠;(3)卡格列净处理的STZ小鼠;(4) BSA处理的STZ小鼠;(5) PDGF蛋白处理的STZ小鼠;(6)卡格列净与BSA共处理的STZ小鼠;(7)卡格列净与PDGF蛋白共处理的STZ小鼠。采集各组小鼠肾脏组织和血清,分析肌成纤维细胞标志物(Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白、 α-SMA)的m RNA水平和蛋白水平、线粒体生物发生的指标(线粒体DNA拷贝数、关键调节因子SIRT1和电子传递链蛋白的不同亚基的表达水平)、血清中PDGF的表达水平。结果 STZ显著增强了Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白和α-SMA的m RNA和蛋白表达;而卡格列净治疗后,这些肌成纤维细胞标志物的表达水平恢复到了正常水平。STZ降低了线粒体DNA拷贝数,而卡格列净可以阻止这种下降。同时,卡格列净纠正了STZ导致的SIRT1、抑制素1 (PHB1)、热休克蛋白60 (HSP60)、电压依赖性阴离子通道(VDHC)、琥珀酸脱氢酶复合物黄素蛋白亚基A (SDHA)和细胞色素C氧化酶Ⅳ(CoxⅣ)的降低。此外, STZ诱导的PDGF的上升因卡格列净的存在而恢复。相比于STZ处理小鼠, STZ与PDGF蛋白共处理的小鼠肾脏中SIRT1的表达水平更低、肌成纤维细胞标志物的m RNA水平更高;相比于STZ与卡格列净共处理小鼠, STZ、 PDGF蛋白与卡格列净共处理的小鼠肾脏中SIRT1的表达水平、肌成纤维细胞标志物的m RNA水平无显著区别。结论 卡格列净治疗可以减轻糖尿病肾病的肾纤维化病变,并且依赖于PDGF/SIRT1介导的线粒体生物发生轴。

关键词

卡格列净 / PDGF / SIRT1 / 糖尿病肾病 / 肾纤维化