miR-181c通过靶向MICU1调控肺移植小鼠心肺功能康复

摘要

目的 探讨微小RNA （miRNA）-181c通过线粒体钙单向转运蛋白1 （mitochondrial calcium uniporter 1, MICU1）对肺移植小鼠心肺功能恢复的作用及机制。方法 将54只C57BL/6小鼠分为正常组、肺移植组、 inhibitor-NC组、肺移植+miR-181c-inhibitor组、肺移植+miR-181c-inhibitor+si-NC组和肺移植+miR-181c-inhibitor+si-MICU1组,每组n=9。正常组仅开胸麻醉;其余均行自体左肺原位移植,术后每周静脉注射0.2 mL生理盐水或10 nmol/mL抑制剂/siRNA,持续60 d。qRT-PCR和蛋白质印迹检测miR-181c及MICU1表达,双荧光素酶报告实验验证miR-181c与MICU1的靶向关系; HE染色评估肺组织病理;小动物肺功能仪检测0.15 s用力呼气容积占用力肺活量百分比(FEV_0.15/FVC)、呼气峰流速值（PEF）、最大通气量（MVV）、一氧化碳弥散量（DLCO）、残气量（RV）;超声心动图检测左心室射血分数（LVEF）、左心室缩短分数（LVFS）、左心室舒张末期内径（LVEDD）、左心室收缩末期内径（LVESD）、左心室舒张末期容积（LVEDV）、左心室收缩末期容积（LVESV）。结果 与正常组相比,肺移植组miR-181c上调（P<0.05）, MICU1下调（P<0.05）,二者负相关(r=-0.378,P=4.21×10^-4)。报告基因实验显示miR-181c能特异性抑制MICU1 3′UTR-WT荧光活性（P<0.05）。敲低miR-181c致MICU1表达水平恢复,肺组织病变减轻, FEV_0.15/FVC、 PEF、 MVV、 DLCO及LVEF、 LVFS增加, RV、 LVESD、 LVEDV、 LVESV减少（P<0.05）;联合敲低miR-181c与si-MICU1致上述改善消失（P<0.05）。结论 miR-181c通过靶向抑制MICU1显著影响肺移植后小鼠心肺功能;敲低miR-181c有助于改善术后心肺功能。

关键词

微小RNA-181c / 线粒体钙单向转运蛋白1 / 肺移植 / 心肺功能康复