异氟醚对高糖诱导的H9C2心肌细胞损伤及PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响

摘要

目的 探讨异氟醚对高糖诱导的H9C2心肌细胞损伤及磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B （protein kinase B,AKT）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）信号通路的影响。方法 选取对数生长期的H9C2心肌细胞,分组为:（1）对照组,未处理的H9C2心肌细胞;（2）高糖组（35 mmol/L葡萄糖）;（3）异氟醚低浓度组（在高糖组的基础上加入1%异氟醚）;（4）异氟醚高浓度组（在高糖组的基础上加入2%异氟醚）;（5）异氟醚高浓度+LY294002组（在高糖组的基础上加入2%异氟醚+50μmol/L LY294002）。CCK-8法检测各组细胞增殖;透射电子显微镜观察各组细胞自噬情况;流式细胞术检测各组细胞凋亡;Western印迹检测各组细胞中PI3 K/Akt/mTOR通路及自噬（Beclin1）、凋亡（Bax）相关蛋白表达。结果 与对照组相比,高糖组细胞中明显可见形成的自噬小体,增殖率、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR降低,细胞凋亡率、Bax、Beclin1蛋白表达显著增加（P<0.05）。与高糖组相比,经不同浓度的异氟醚处理后,细胞增殖率、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR显著增加,自噬小体减少,细胞凋亡率、Bax、Beclin1蛋白表达显著下降（P<0.05）;与异氟醚高浓度组相比,异氟醚高浓度+LY294002组细胞增殖率、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mmTOR/mTOR降低,自噬小体增多,细胞凋亡率、Bax、Beclin1蛋白表达显著增加（P<0.05）。结论异氟醚可以抑制高糖诱导的H9C2心肌细胞自噬、凋亡,提高细胞存活率,减少细胞损伤,可能与PI3K/Akt/mTOR通路的激活有关。

关键词

异氟醚 / PI3K/Akt/mTOR通路 / 高糖 / 细胞凋亡 / 自噬 / 心肌细胞损伤