lncRNA OSTN-AS1下调miR-4461表达促进前列腺癌LNCaP细胞增殖、迁移和侵袭

摘要

目的 探究长链非编码RNA (long non-coding RNA,lncRNA) OSTN反义RNA1 (OSTN antisense RNA1,OSTN-AS1)对前列腺癌LNCaP细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法 以前列腺上皮细胞RWPE-1为对照,实时荧光定量PCR (qRT-PCR)法检测LNCaP细胞中OSTN-AS1、miR-4461表达。转染OSTN-AS1小干扰RNA (si-OSTN-AS1)或miR-4461模拟物、或共转染si-OSTN-AS1与miR-4461抑制剂至LNCaP细胞,细胞计数试剂盒-8 (CCK-8)法、划痕实验、Transwell、蛋白质印迹法分别检测细胞增殖、迁移、侵袭及相关蛋白[Ki-67、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、MMP-9]表达。双荧光素酶报告基因实验验证OSTN-AS1与miR-4461的调控关系。结果 LNCaP细胞中OSTN-AS1表达量较RWPE-1细胞升高(3.38±0.26 vs.1.00±0.00,P<0.05),miR-4461表达量较RWPE-1细胞降低(0.46±0.04vs.1.00±0.00,P<0.05)。干扰OSTN-AS1或过表达miR-4461后,LNCaP细胞增殖活性、划痕愈合率、侵袭数降低,同时细胞中Ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白表达量也降低(P_均<0.05)。OSTN-AS1靶向结合miR-4461,且干扰OSTN-AS1表达的LNCaP细胞中miR-4461表达量增加(P<0.05)。下调miR-4461逆转了干扰OSTN-AS1对LNCaP细胞增殖、迁移、侵袭及相关蛋白表达的影响。结论 干扰OSTN-AS1可通过靶向上调miR-4461抑制前列腺癌LNCaP细胞增殖、迁移和侵袭。

关键词

OSTN-AS1 / miR-4461 / 前列腺癌 / 细胞增殖 / 迁移 / 侵袭