肾癌细胞外泌体上调PD-1抑制CD8⁺T细胞肿瘤杀伤功能

摘要

目的 探究肾癌细胞外泌体调控CD8⁺T细胞肿瘤杀伤功能。方法 将HK-2 exo、 786-O exo、SN12-PM6 exo（10μg/m L）以及等体积的磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffered solution, PBS）与CD8⁺T细胞共孵育,细胞毒性实验检测杀伤功能,酶联免疫吸附检测（ELISA）测定干扰素-γ（interferon-γ, IFN-γ）、白介素-2（interleukin 2, IL-2）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α, TNF-α）浓度,蛋白质印迹检测CD8⁺T细胞程序性死亡受体1（programmed death-1, PD-1）表达。CD8⁺T转染PD-1 siRNA（si-PD-1）以及si RNA Negative Control（si-NC）后分别与786-O exo和SN12-PM6 exo共孵育24 h后检测CD8⁺T细胞对786-O和SN12-PM6细胞杀伤功能。结果 相比于PBS组, 786-O exo组、 SN12-PM6 exo组CD8⁺T细胞分泌IFN-γ、 IL-2以及TNF-α浓度显著降低（P<0.05）,杀伤786-O和SN12-PM6能力显著降低（P<0.05）,PD-1蛋白表达显著上调（P<0.05）。而转染si-PD-1的CD8⁺T细胞与786-O exo和SN12-PM6 exo共孵育后,分泌IFN-γ、 IL-2和TNF-α浓度以及杀伤786-O和SN12-PM6的能力均显著高于转染si-NC且与786-O exo和SN12-PM6 exo共孵育后的CD8⁺T细胞（P_均<0.05）。结论 肾癌细胞外泌体诱导CD8⁺T细胞PD-1表达而抑制肿瘤杀伤功能。

关键词

肾癌 / 外泌体 / CD8⁺T细胞 / 程序性死亡受体1