BMP9通过P38 MAPK信号通路对成骨细胞自噬和凋亡的作用研究

摘要

目的 研究BMP9对P38 MAPK信号通路的调控作用以及对成骨细胞自噬和凋亡的影响。方法体外培养小鼠MC3T3-E1成骨细胞系,用雷帕霉素（rapamycin）诱导细胞发生自噬,Western印迹检测BMP9、P38、p-P38的蛋白表达。再将细胞随机分组后进行相应处理,分别为pcDNA3.1-BMP9组（pcDNA3.1-BMP9）、BMP9 siRNA组（BMP9 siRNA）、P38激活组（茴香霉素,10μmol/L）、P38抑制组（SB-202190,10μmol/L）、pcDNA3.1-BMP9+P38抑制组（pcDNA3.1-BMP9+SB-202190,10μmol/L）、BMP9siRNA+P38激活组（BMP9 siRNA+茴香霉素,10μmol/L）以及对照组。Western印迹检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin-1和P62的表达,CCK-8和流式细胞技术检测细胞的增殖和凋亡情况。结果 雷帕霉素处理后的MC3 T3-E1细胞中LC3-Ⅱ、Beclin-1、BMP9和p-P38蛋白升高（P<0.05）,P62蛋白降低（P<0.05）。pcDNA3.1-BMP9组、P38激活组LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白升高（P<0.05）,P62蛋白降低（P<0.05）;BMP9siRNA组、P38抑制组LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白降低（P<0.05）,P62蛋白升高（P<0.05）。pcDNA3.1-BMP9+P38抑制组和BMP9 siRNA+P38激活组LC3-Ⅱ、Beclin-1和P62蛋白水平与对照组均无差异（P_均>0.05）。pcDNA3.1-BMP9组细胞增殖率升高、凋亡率降低（P_均<0.05）;BMP9 siRNA细胞增殖率降低,凋亡率升高（P_均<0.05）。P38激活组细胞增殖率升高,凋亡率降低（P_均<0.05）;P38抑制组细胞增殖率降低,凋亡率升高（P_均<0.05）。pcDNA3.1-BMP9+P38抑制组和BMP9 siRNA+P38激活组细胞增殖率、凋亡率与对照组均无差异（P_均>0.05）。结论 BMP9能激活P38 MAPK通路,诱导成骨细胞自噬,减少细胞凋亡。

关键词

成骨细胞 / 骨形成蛋白 / P38 MAPK通路 / 自噬 / 凋亡