干扰LncRNA BCYRN1对乳腺癌MCF-7细胞增殖、运动和移植瘤生长的影响

摘要

目的 探讨短发卡RNA (short hairpin RNA,shRNA)干扰长链非编码RNA BCYRN1 (long noncoding RNA BCYRN1,LncRNA BCYRN1)对乳腺癌MCF-7细胞增殖、运动及移植瘤生长的影响。方法 实时定量PCR (real-time quantitative PCR,RT-PCR)检测乳腺癌及癌旁组织BCYRN1表达,将乳腺癌MCF-7细胞分为空白对照组(Control)、阴性对照组(shRNA-NC)和干扰组(sh-BCYRN1),通过试剂盒转染转入目的片段并进行RT-PCR验证,Edu法、transwell法、划痕实验和蛋白质印迹法(Western blotting)分别检测细胞增殖、侵袭、迁移能力及其相关蛋白表达,免疫荧光检测细胞波形蛋白(Vimentin)水平。通过裸鼠腋下注射MCF-7细胞建立裸鼠移植瘤模型,待成瘤后将裸鼠分为空白对照组、干扰组,每组各20只,干扰组、空白对照组裸鼠分别给予sh-BCYRN1及其阴性对照转染干预,观察4周后移植瘤BCYRN1表达、肿瘤重量和Ki67、N-钙粘蛋白(N-cadherin)蛋白表达。结果 乳腺癌组织BCYRN1表达高于癌旁组织(P<0.05)。比较空白对照组,干扰组Edu阳性细胞百分比、单个视野细胞侵袭数目、细胞迁移率、Vimentin阳性率降低(P<0.05),Ki67、N-cadherin蛋白表达降低,E-钙粘蛋白(E-cadherin)蛋白表达升高(P<0.05)。干扰组移植瘤BCYRN1表达降低,肿瘤质量、Ki67及N-cadherin蛋白表达低于空白对照组移植瘤(P<0.05)。结论shRNA干扰LncRNA BCYRN1可抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖、运动和移植瘤生长。

关键词

长链非编码RNA / BCYRN1 / MCF-7乳腺癌细胞 / 细胞增殖 / 移植瘤