下调长链非编码RNA XIST靶向miR-124/NF-κB轴缓解IL-1β诱导的软骨细胞凋亡

摘要

目的 探究长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA) X染色体失活特异性转录本基因(X inactive specific transcript, XIST)对白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)诱导的软骨细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 生物信息学预测XIST和miR-124靶向关系并通过双荧光素酶法进行验证;实验设置正常组、 IL-1β组、 si-NC组、 si-XIST组、 miR-124-NC组、 miR-124 mimics组、 si-NC + inhibitor-NC组、 si-XIST + inhibitor-NC组、 si-NC + miR-124 inhibitor组、 si-XIST + miR-124 inhibitor组。qRT-PCR检测细胞中XIST和miR-124表达;蛋白质印迹检测核因子κB P65(nuclear factor kappa B P65, NF-κB P65)蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡。结果 lncRNA XIST和miR-124间存在靶向关系;相较于正常组, IL-1β诱导的软骨细胞中lncRNA XIST表达水平、 NF-κB P65蛋白表达和细胞凋亡率显著升高, miR-124表达水平显著降低(P<0.05);相较于IL-1β组, si-XIST组和miR-124 mimics组NF-κB P65蛋白表达和细胞凋亡率显著降低(P<0.05);相较于si-NC + inhibitor-NC组, si-XIST + inhibitor-NC组NF-κB P65蛋白表达和细胞凋亡率显著降低,与si-NC + miR-124 inhibitor组比较, si-XIST + miR-124 inhibitor组NF-κB P65蛋白表达和细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。结论 下调lncRNA XIST可靶向调节miR-124/NF-κB轴,从而缓解IL-1β诱导的软骨细胞凋亡。

关键词

长链非编码RNA XIST / miR-124 / NF-κB / 软骨细胞 / 细胞凋亡