胆绿素还原酶在巨噬细胞分化模型中表达情况

摘要

目的 探讨巨噬细胞分化模型中BVR的表达情况方法 体外培养L929细胞2d,收集L929细胞上清,用此培养基来体外培养小鼠骨髓来源巨噬细胞7 d,分别用LPS 100 ng/mL和IFN-γ 100 ng/mL、IL-4 10 ng/mL和IL-13 10 ng/mL刺激24 h后收集细胞。用Western印迹检测INOS和ARG-1的表达;用流式细胞术检测CD45、F4/80、CD11b、CD86和DECTIN-1的表达;用RT-PCR检测INOS、ARG-1、FN和FIZZ1的表达来判断M1和M2的模型是否建立成功,然后在巨噬细胞模型中检测BVR的表达。同时在RAW264.7细胞系构建的巨噬细胞分化模型中检测BVR的表达。结果(1)Western印迹发现LPS和IFN-γ组(M1巨噬细胞)INOS表达增加,IL-4和IL-13组(M2巨噬细胞)ARG-1表达增加;(2)流式细胞术发现LPS和IFN-γ组巨噬细胞中CD86表达增加,IL-4和IL-13组巨噬细胞中DECTIN-1表达增加;(3)RT-PCR发现LPS和IFN-γ组巨噬细胞中INOS和TNF-α表达增加;IL-4和IL-13组巨噬细胞中ARG-1、FN和FIZZ1表达增加;(4)RT-PCR发现在小鼠骨髓来源的巨噬细胞和RAW264.7细胞系巨噬细胞分化模型中BVR均在M1表达降低,在M2中表达增加。结论(1)LPS和IFN-y,IL-4和IL-13刺激小鼠骨髓来源巨噬细胞构建M1和M2模型成功;(2)BVR在小鼠骨髓来源巨噬细胞和小鼠单核巨噬细胞系构建的巨噬细胞分化模型中均在M1中表达降低,在M2中表达增加。

关键词

巨噬细胞 / 胆绿素还原酶 / 分化