佛手苷内酯下调miR-503表达抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞炎性因子表达和细胞凋亡

摘要

目的 考察佛手苷内酯(bergapten,BG)是否通过下调miR-503表达抑制高糖(high glucose,HG)诱导的肾小管上皮细胞炎性因子表达和细胞凋亡。方法 将肾小管上皮细胞分为正常对照(Con)组、高糖(HG)组、高糖+BG低、中、高浓度(HG+BG-L、-M、-H)组、HG+inhibitor-NC组、HG+miR-503 inhibitor组、HG+BG+miR-NC组、HG+BG+miR-503组。利用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定炎性因子肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)表达,流式细胞术测定细胞凋亡,Western印迹测定凋亡蛋白裂解天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(cleaved-caspase) 3、cleaved-caspase 9表达,qRT-PCR测定miR-503表达。结果 HG组肾小管上皮细胞的TNF-α、IL-6表达、凋亡率、cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 9蛋白、miR-503表达量均比Con组增加(P_均<0.05)。HG+BG-L组、HG+BG-M组、HG+BG-H组肾小管上皮细胞的TNF-α、IL-6表达、凋亡率、cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 9蛋白、miR-503表达量均比HG组减少(P_均<0.05),且BG的抑制作用呈现浓度依赖性。干扰miR-503表达后,HG+miR-503 inhibitor组肾小管上皮细胞的miR-503表达量、TNF-α、IL-6表达、凋亡率、cleaved-caspase 3蛋白、cleaved-caspase 9蛋白均比HG+inhibitor-NC组降低(P_均<0.05)。HG+BG+miR-503组肾小管上皮细胞的miR-503表达量、TNF-α、IL-6表达、凋亡率、cleaved-caspase 3蛋白、cleaved-caspase 9蛋白表达量均高于HG+BG+miR-NC组(P_均<0.05)。结论 BG通过下调miR-503的表达,以浓度依赖方式抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞炎性因子表达和细胞凋亡。

关键词

糖尿病肾病 / 佛手苷内酯 / 肾小管上皮细胞 / miR-503 / 炎性因子 / 细胞凋亡