舒芬太尼诱导宫颈癌细胞自噬和凋亡并抑制癌细胞恶性增殖

摘要

目的 探讨舒芬太尼对宫颈癌细胞SiHa自噬、凋亡及细胞增殖的影响。方法 采用CCK8法检测舒芬太尼梯度浓度(3.125、6.25、12.5、25、50、100、200、400、800 nmol/L)作用下宫颈癌细胞SiHa细胞活力,选取4个舒芬太尼作用浓度(0、25、50、100 nmol/L)处理SiHa细胞24 h,采用流式细胞法、克隆形成实验检测SiHa细胞凋亡及增殖情况,免疫荧光法检测各组细胞LC3水平,采用Western印迹检测自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、ATG7与增殖、凋亡相关蛋白P21、Survivin水平,采用RT-PCR检测细胞增殖相关基因Ki67、PCNA表达水平。结果 随着舒芬太尼处理浓度的增加,SiHa细胞活力逐渐降低。50、100 nmol/L舒芬太尼处理下SiHa细胞的LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、ATG7水平显著高于0 nmol/L舒芬太尼处理,免疫荧光检测结果显示50、100 nmol/L舒芬太尼处理下LC3荧光信号高于0nmol/L舒芬太尼处理,流式细胞仪检测结果显示50、100 nmol/L舒芬太尼处理下SiHa细胞凋亡高于0 nmol/L舒芬太尼处理。克隆形成实验结果显示50、100 nmol/L舒芬太尼处理下SiHa细胞克隆形成率降低,Survivin水平与Ki67、PCNA表达水平降低,而P21水平升高。结论 舒芬太尼对宫颈癌细胞自噬、凋亡有促进作用,对细胞增殖有抑制作用,可能与调节细胞自噬、凋亡、增殖相关蛋白或基因水平有关。

关键词

宫颈癌 / 舒芬太尼 / 细胞自噬 / 细胞凋亡 / 细胞增殖