利用巢式PCR来提高检测新冠病毒的灵敏度的探索

摘要

目的 目前,中国新冠疫情虽已基本控制,但仍需对新冠病毒进行大规模检测。因而需建立或改进能够特异灵敏大规模地检测新冠病毒的方法,进一步提高新冠病毒检测的灵敏度和准确性。方法 研究设计巢式PCR偶联qRT-PCR的检测方法用以克服多人份样本混合稀释所造成的病毒拷贝数过低导致的检测不准确。首先,通过外引物PCR大幅提高被检测样本的拷贝数,再在此基础上通过荧光定量PCR检测由国家疾控中心(CDC)推荐的N基因序列。结果 在降低其检测假阳性率的同时,最终可以将检测灵敏度在原来的基础上提高了3个数量级,稳定地检测到单个拷贝的病毒模板。结论 此研究可大幅度提高新冠病毒检测的灵敏度,为大规模多人份样本混合检测提供可行的方法。

关键词

新冠病毒 / 核酸检测 / 定量PCR / 灵敏度 / 假阳性率