干扰Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1表达对急性肺损伤小鼠的保护作用

摘要

目的 研究干扰Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1对脂多糖(lipopolysaccharides, LPS)诱导的急性肺损伤(acute lung injury, ALI)小鼠的影响。方法 C57BL/6小鼠随机分为4组:正常对照组、模型组、阴性对照组、 ROCK1干扰组,每组10只。腹腔注射5 mg/kg LPS诱导建立急性肺损伤小鼠模型。RTPCR和蛋白质印迹检测Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1 (Rho-associated coiled coil formation protein kinase1, ROCK1)表达水平,肺功能检测系统检测干扰ROCK1对小鼠气道阻力、静息通气量和肺容积的影响,HE染色观察干扰ROCK1对肺组织结构的影响, Masson染色观察干扰ROCK1对肺纤维化程度的影响,蛋白质印迹检测α-SMA、 TGF-β1和FN蛋白水平, TUNEL检测干扰ROCK1对肺组织细胞凋亡的影响, ELISA检测i NOS、 IL-6和TNF-α炎性因子的含量水平。结果 与正常对照组比较,模型组小鼠ROCK1高表达,肺损伤严重。与模型组比较, ROCK1干扰组小鼠ROCK1低表达(P<0.05),气道阻力、静息通气量和肺容积均显著升高(P<0.05),肺组织病理损伤和纤维化程度均得到改善, α-SMA、 TGF-β1、 FN蛋白水平显著降低(P<0.05),肺凋亡细胞数显著减少(P<0.05),外周血中i NOS、 IL-6和TNF-α含量水平显著降低(P<0.05)。结论 干扰ROCK1表达能够改善LPS诱导的急性肺损伤小鼠肺功能、肺纤维化、细胞凋亡和炎症。

关键词

ROCK1 / 脂多糖 / 急性肺损伤