Nrf2对新生缺氧缺血性脑病大鼠脑损伤和小胶质细胞极化的影响

摘要

目的 探究核因子-E2相关因子2 （nuclear factor erythroid 2 related factor 2, Nrf2）是否通过介导小胶质细胞极化影响新生缺氧缺血性脑病（hypoxic-ischemic encephalopathy, HIE）大鼠脑损伤。方法 实验分为Sham组、 HIE组、 Sham+Nrf2组、 HIE+Nrf2组,每组10只新生SD大鼠,建立HIE模型,脑室注射转染空载包装的腺病毒或含Nrf2过表达载体的腺病毒, 14 d后, 2, 3, 5氯化三苯基四氮唑（2, 3, 5-triphenyltetrazolium chloride, TTC）染色检测脑梗死情况,苏木素-伊红（HE）染色观察脑组织病理学变化,酶联免疫吸附实验（ELISA）测定脑组织中肿瘤坏死因子-α （TNF-α）、白细胞介素-1β （IL-1β）、白细胞介素-6 （IL-6）、白细胞介素-10 （IL-10）的水平,免疫荧光双标染色检测脑组织离子钙接头蛋白（ionized calcium binding adaptor molecule-1, Iba-1）/诱导型一氧化氮合成酶（inducible nitric oxide synthase, i NOS）标记的M1型小胶质细胞比例与Iba-1/精氨酸酶1 （Arg-1）标记的M2型小胶质细胞比例,蛋白质印迹检测脑组织i NOS、 CD86、 Arg-1、巨噬细胞甘露糖受体（CD206）及Nrf2、脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor, BDNF）、胶质细胞源性神经营养因子（glialcellline-derivedneurotrophicfactor, GDNF）的蛋白表达水平。结果 与HIE组比较, HIE+Nrf2组新生大鼠脑梗死体积显著减少,脑组织神经元核固缩比例显著降低,脑组织中TNF-α、 IL-1β和IL-6水平显著下降, IL-10水平显著上升, Iba-1⁺/i NOS⁺标记的M1型小胶质细胞占比显著下降, Iba-1⁺/Arg-1⁺标记的M2型小胶质细胞占比显著上升,脑组织中i NOS和CD86蛋白表达水平显著下调, Arg-1、 CD206、 Nrf2、 BDNF和GDNF蛋白表达水平显著上调（P<0.05）。结论 Nrf2通过促进新生HIE大鼠脑组织内小胶质细胞由M1型向M2型转化,减轻神经炎症,从而改善HIE新生大鼠脑损伤。

关键词

缺氧缺血性脑病 / 核因子-E2相关因子2 / 小胶质细胞极化 / 炎症