乌头汤调节Ahr/LOC101928120/SHC1信号通路抑制炎症和氧化应激对人尿源性干细胞的损伤

摘要

目的 探讨乌头汤（Wutou decoction, WTD）调节芳烃受体（aryl hydrocarbon receptor, Ahr）/长链非编码RNA （long non-coding RNA, Lnc RNA） LOC101928120/SHC衔接蛋白1 （SHC articulin 1,SHC1）信号通路抑制炎症和氧化应激对人尿源性干细胞（urogenic stem cells, Ud SC）损伤的机制。方法 将Ud SC细胞分为Control组、 IL-1β组、 IL-1β+WTD组、 H₂O₂组、 H₂O₂+WTD组。Cell Titer Glo法、流式细胞术检测各组细胞中的增殖、凋亡; q RT-PCR检测各组细胞中Ahr、 LOC101928120、 SHC1 m RNA水平;蛋白质印迹检测各组细胞中Ahr、 HDAC1、 SHC1、 COL2、 SOX-9的表达; ELISA检测炎症诱导的Ud SC细胞中IL-6、 TNF-α及MMP-13的表达; DCFH-DA荧光探针检测氧化应激诱导Ud SC细胞中的ROS水平。结果 IL-1β组A_{560 nm}值, Ahr m RNA和蛋白水平, LOC101928120 m RNA水平, COL2、 SOX-9蛋白水平低于Control组, IL-1β+WTD组以上各指标高于IL-1β组（P<0.05）; IL-1β组凋亡率, IL-6、 TNF-α、 MMP-13水平, SHC1 m RNA和蛋白水平, HDAC1蛋白水平高于Control组, IL-1β+WTD组以上各指标低于IL-1β组（P<0.05）。H₂O₂组A_{560 nm}值, Ahr m RNA和蛋白水平, LOC101928120 m RNA水平, COL2、 SOX-9蛋白水平低于Control组, H₂O₂+WTD组以上各指标高于H₂O₂组（P<0.05）; H₂O₂组凋亡率、 ROS阳性细胞比例、SHC1 m RNA和蛋白水平、 HDAC1蛋白水平高于Control组, H₂O₂+WTD组以上各指标低于H₂O₂组（P<0.05）。结论 WTD可抑制炎症和氧化应激诱导的人Ud SC损伤,其机制可能是通过调节Ahr/LOC101928120/SHC1信号通路实现的。

关键词

乌头汤 / Ahr/LOC101928120/SHC1信号通路 / 炎症 / 氧化应激 / 人尿源性干细胞