miR-490-5p调节低氧诱导的喉癌FaDu细胞炎症反应和血管生成的体外研究

摘要

目的 探究微小RNA-490-5p (miR-490-5p)对低氧诱导下人喉癌细胞炎症反应和血管生成的影响及分子机制。方法 人下咽鳞状细胞癌细胞株FaDu分为对照组(常氧环境培养)、低氧组(低氧环境培养)、低氧+NC组(低氧环境培养+转染mimics NC)、低氧+miR-490-5p组(低氧环境培养+转染miR-490-5p mimics)。实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测miR-490-5p表达, CCK-8法检测细胞增殖活性,ELISA实验测定细胞上清液中肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白细胞介素IL-1β和IL-6水平,蛋白质印迹检测细胞中核因子κB (NF-κB)途径相关蛋白质表达,体外血管生成实验检测HUVEC管形成数目, RT-qPCR和蛋白质印迹检测细胞中血管内皮细胞生长因子(VEGF)、表皮生长因子(EGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达。结果 与对照组比较,低氧组FaDu细胞中miR-490-5p相对表达量显著下调(P<0.05),增殖活性显著升高(P<0.05),上清液中TNF-α、 IL-1β和IL-6含量显著增加(P<0.05),磷酸化NF-κB P65 (p-NF-κB P65)和磷酸化IκB激酶α (p-IκBα)蛋白相对表达量显著上调(P<0.05), HUVEC管形成数目显著增加(P<0.05), VEGF、 EGF、 HIF-1α的m RNA和蛋白质水平显著上调(P<0.05);与低氧+NC组比较,低氧+miR-490-5p组FaDu细胞中miR-490-5p相对表达量显著上调(P<0.05),增殖活性显著降低(P<0.05),上清液中TNF-α、 IL-1β和IL-6含量显著减少(P<0.05), p-NF-κB P65和p-IκBα相对表达量显著下调,同时, HUVEC管形成数目显著减少(P<0.05), VEGF、 EGF、 HIF-1α的m RNA和蛋白质水平也显著下调(P<0.05)。结论 在低氧环境下,过表达miR-490-5p能够抑制喉癌细胞的炎症反应和血管生成。

关键词

喉癌 / 低氧 / miR-490-5p / 炎症 / 血管生成