FOXO4对脂多糖诱导的心肌细胞凋亡的抑制作用

摘要

目的 探讨叉头盒O4 (forkhead box O4, FOXO4)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的心肌细胞炎症反应和细胞凋亡的影响,并初步探讨潜在的分子机制。方法 将LPS处理的H9C2细胞分别用FOXO4重组慢病毒载体(LPS+Lv-FOXO4)、对照载体(LPS+Lv-NC组)和/或nigericin (LPS+LvFOXO4+N组)处理FOXO4。实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测FOXO4 m RNA表达。酶联免疫吸附实验检测细胞上清液中TNF-α和IL-1β的水平。流式细胞术检测细胞凋亡。蛋白质印迹分析FOXO4和NF-κB/NLRP3通路相关蛋白表达。结果 LPS处理能够抑制心肌细胞中FOXO4的表达(P<0.05),而FOXO4过表达能够降低LPS处理的心肌细胞中TNF-α和IL-1β水平,抑制心肌细胞凋亡,降低促凋亡蛋白Bax表达并增加抗凋亡蛋白Bcl-2表达(P<0.05)。此外, FOXO4过表达能够通过抑制P65、 IκBα磷酸化和P65核移位来抑制NF-κB信号通路活化(P<0.05)。FOXO4过表达可通过抑制NLRP3、 ASC、 cleaved caspase-1和N-GSDMD蛋白表达来抑制NLRP3炎症小体活化和细胞焦亡(P<0.05),而NLRP3炎症小体激活剂尼日利亚菌素能够逆转FOXO4过表达对LPS诱导心肌细胞损伤的保护作用(P<0.05)。结论 FOXO4过表达可保护心肌细胞免受LPS刺激引起的炎症和凋亡,这可能是通过抑制NF-κB/NLRP3炎症小体信号通路介导的细胞焦亡来实现。

关键词

FOXO4 / 心肌细胞 / 炎症 / 凋亡 / 焦亡 / NLRP3炎症小体 / NF-κB