基于生物信息学分析结肠癌关键基因DHCR7及其功能验证

摘要

目的 探讨脱氢胆固醇还原酶7 (7-dehydrocholesterol reductase, DHCR7)对结肠癌(colon cancer, CC)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响及调控机制。方法 利用生物信息学方法分析DHCR7表达与结肠癌癌免疫浸润、预后及抗肿瘤药物敏感度的关系。q RT-PCR、蛋白质印迹及IHC检测DHCR7的m RNA和蛋白表达水平。MTT和克隆形成实验、流式细胞术、细胞划痕和Transwell实验分别分析敲减DHCR7对细胞增殖的影响、细胞周期与凋亡、细胞迁移与侵袭的影响。通过基因富集分析筛选DHCR7调控的关键信号通路,并利用蛋白质印迹实验进行验证。结果 生物信息学分析显示, DHCR7在结肠癌组织中高表达与结肠癌N分期、特异性生存期、无进展生存期、肿瘤免疫浸润水平及药物敏感度相关。在结肠癌组织和细胞系中, DHCR7表达上调。敲减DHCR7表达能够抑制HCT116细胞的增殖、迁移和侵袭。Wnt信号通路是DHCR7在CC中调控的关键信号通路之一,敲减DHCR7能够抑制Wnt信号通路。结论 DHCR7调控Wnt信号通路促进结肠癌细胞EMT,从而促进HCT116细胞的增殖、迁移和侵袭。

关键词

结肠癌 / 脱氢胆固醇还原酶7 / 细胞增殖 / 细胞迁移 / Wnt信号通路