过表达lincRNA-p21的间充质干细胞对小鼠急性肺损伤的修复作用研究

摘要

目的 探讨基因间长链非编码RNA （long intergenic non-coding RNA,lincRNA）-p21过表达的间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）对小鼠急性肺损伤（acute lung injury,ALI）的修复作用。方法将70只雄性C57BL/6小鼠随机分为7组,每组10只,分别为假手术组、ALI组、MSC+ALI组、p21-MSC+ALI组、空载体-MSC+ALI组、p21+ALI组、空载体+ALI组。实时荧光定量PCR （qRT-PCR）法检测各组肺组织中lincRNA-p21的表达。ELISA法检测肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β、IL-8、IL-6、IL-10、IL-13、IL-1Ra、caspase3的表达。检测动脉血氧分压（PaO₂）、肺系数（lung index,LI）、肺通透指数（lung permeability index,LPI）、氧合指数（oxygenation index,OI）的影响。蛋白质印迹法检测肺组织中Bcl-2、Bax、caspase3、cleaved-caspase3的表达。结果 与假手术组比较,ALI组lincRNA-p21、IL-10、IL-13、IL-1Ra、Bcl-2、PaO₂及OI的水平都下调,LI、LPI、TNF-α、IL-1β、IL-8、IL-6、Bax、caspase3、cleaved-caspase3的水平都上调,凋亡细胞比例增加（P_均<0.05）。与ALI组比较,MSC+ALI组IL-10、IL-13、IL-1Ra、Bcl-2、PaO₂及OI的水平都上调,LI、TNF-α、IL-1β、IL-8、IL-6、Bax、caspase3、cleaved-caspase3的水平都下调,凋亡细胞比例减少（P_均O<0.05）,而lincRNA-p21的表达和LI的水平变化不明显（P>0.05）。与空载体-MSC+ALI组比较,p21-MSC+ALI组中lincRNA-p21、IL-10、IL-13、IL-1Ra、Bcl-2、PaO₂及OI的水平都上调,LI、LPI、TNF-α、IL-1β、IL-8、IL-6、Bax、caspase3、cleaved-caspase3的水平都下调,凋亡细胞比例减少（P_均<0.05）。与空载体+ALI组比较,p21+ALI组中lincRNA-p21、IL-10、IL-13、IL-1Ra、Bcl-2、PaO₂及OI的水平都上调（P_均<0.05）,LI、LPI、TNF-α、IL-1β、IL-8、IL-6、Bax、caspase3、cleaved-caspase3的水平都下调,凋亡细胞比例减少（P_均<0.05）。结论过表达lincRNA-p21的MSCs对ALI小鼠的炎症损伤和肺部细胞凋亡具有抑制作用。

关键词

基因间长链非编码RNA-p21 / 间充质干细胞 / 急性肺损伤 / 小鼠 / 炎症 / 凋亡