肝细胞癌患者血清外泌体中PD-L1的表达及其临床意义

摘要

目的 探究肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者血清外泌体中程序性死亡配体-1(programmed death ligand 1,PD-L1)的表达水平及临床意义。方法 采用ExoQuick试剂盒提取75例HCC患者和15名健康对照者血清样本中的外泌体,分别利用透射电镜、NanoSight以及Western印迹对其进行鉴定;采用RT-qPCR检测血清外泌体中PD-L1 mRNA的表达差异;采用卡方检验分析血清外泌体PD-L1 mRNA表达水平与患者临床病理学特征的关系;采用Kaplan-Meier法结合Cox回归分析探究血清外泌体PD-L1mRNA表达的预后价值。结果 透射电镜和NanoSight结果显示HCC患者和健康对照者血清中的外泌体粒径主要集中100 nm左右,Western印迹检测可见外泌体均表达CD9和TSG101标志蛋白,而不表达细胞骨架蛋白Calnexin。RT-qPCR检测结果显示,HCC患者血清外泌体中PD-L1 mRNA的表达水平明显高于健康对照者(t=11.670,P<0.001),其高表达与肿瘤直径、肿瘤数目、Child-Pugh分级、AFP水平以及门静脉癌栓有关(P_均<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,血清外泌体PD-L1 mRNA高表达组HCC患者的总生存期较低表达组明显缩短(P=0.004)。单因素和多因素Cox回归分析表明,血清外泌体PD-L1 mRNA高表达是HCC患者总生存期缩短的独立危险因素(R=2.013,95%CI:1.012～3.669,P=0.015)。结论HCC患者血清外泌体中PD-L1表达明显上调,且与肿瘤的恶性进展和不良预后密切相关,具有成为HCC预后标志物的巨大潜力。

关键词

肝细胞癌 / 外泌体 / PD-L1 / 预后