PD-1抑制剂通过STAT6介导肿瘤相关巨噬细胞极化抑制前列腺癌细胞的增殖和侵袭

摘要

目的 探究PD-1抑制剂对肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAM)极化和前列腺癌细胞增殖和侵袭的作用及其相关机制。方法 采集25例前列腺癌患者肿瘤及癌旁组织,实时定量荧光PCR (qRT-PCR)检测程序性死亡因子1 (programmed death-1,PD-1)、巨噬细胞甘露糖受体(macrophage mannose receptor,CD206)和信号转导和转录激活因子6 (signal transduction and transcription activator 6,STAT6)表达水平并进行斯皮尔曼(Spearman)相关性分析。将人单核细胞白血病细胞(human monocytic leukemia cells,THP-1)细胞诱导为TAM,期间加入PD-1抑制剂Camrelizumab,分组为M0组、MO+Camrelizumab组、TAM组、TAM+Camrelizumab组;THP-细胞诱导为TAM期间加入STAT6抑制剂AS1517499,分组为M0组、M0+AS1517499组、TAM组、TAM+AS1517499组。通过qRT-PCR和蛋白质印迹法检测STAT6和CD206表达水平,酶联免疫吸附反应检测白介素13 (interleukin-13,IL-13)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)和一氧化氮合成酶(nitric oxide synthase,iNOS)分泌水平。将各组细胞分别与前列腺癌细胞DU145共孵育,通过CCK8检测DU145细胞增殖水平,Transwell检测DU145细胞侵袭水平。结果 与癌旁组织相比,前列腺肿瘤组织中PD-1、CD206和STAT6表达水平升高,并在肿瘤组织中呈正相关(P_均<0.05)。与M0组相比,TAM组CD206和STAT6表达水平升高,IL-13、TGF-β分泌水平增加,iNOS分泌水平减少,与其共孵育的DU145细胞增殖水平升高,侵袭能力增强(P_均<0.05)。与TAM组相比,TAM+Camrelizumab组CD206和STAT6表达水平降低,IL-13、TGF-β分泌水平减少,iNOS分泌水平增加,与其共孵育的DU145细胞增殖水平降低,侵袭能力减弱(P_均<0.05)。与TAM组相比,TAM+AS1517499组CD206表达水平降低,IL-13、TGF-β分泌水平减少,iNOS分泌水平增加,与其共孵育的DU145细胞增殖水平降低,侵袭能力减弱(P_均<0.05)。结论PD-1抑制剂通过抑制巨噬细胞向TAM极化从而降低前列腺癌细胞的增殖和侵袭,其作用机制可能是通过抑制巨噬细胞STAT6通路实现。

关键词

肿瘤相关巨噬细胞 / 巨噬细胞极化 / 前列腺癌 / PD-1抑制剂