FTO调控FBXW7的m6A甲基化修饰促进宫颈癌放化疗抵抗的机制研究

摘要

目的 探讨肥胖相关蛋白(obesity-associated protein,FTO)和F框/WD-40域蛋白7 (F-box and WD-40 domain protein 7,FBXW7)在宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)放化疗抵抗中的作用。方法 实时荧光聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)和Western印迹检测CSCC细胞中FTO和FBXW7表达。TCGA (The Cancer Genome Atlas)数据分析FTO和FBXW7表达及相关性。在CSCC细胞中过表达FTO,免疫沉淀检测FBXW7的mRNA的m6A表达变化。四甲基偶氮唑盐比色法[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]检测FTO和FBXW7在CSCC细胞放化疗抵抗中的作用。结果 与人正常宫颈上皮细胞(HUCEC)比较,FTO和FBXW7在CSCC细胞(SiHa,c-33a)中弱表达(P<0.05);FTO调控FBXW7的mRNA的m6A甲基化水平。过表达FTO的CSCC细胞在经过照射和顺铂处理后,细胞存活比例下降,放化疗抵抗减轻(P<0.05);而在此基础上抑制FBXW7,治疗后的细胞存活比例增加,诱导了CSCC放化疗抵抗(P<0.05)。结论FTO可以去除FBXW7的m6A甲基化修饰,上调FBXW7的表达,抑制CSCC对放化疗的抵抗。FTO对CSCC恶性表型的影响是通过FBXW7实现的。

关键词

宫颈鳞状细胞癌 / 肥胖相关蛋白 / FBXW7 / m6A甲基化 / 放化疗抵抗