p53正向调控TIMP2并抑制结直肠癌细胞恶性表型

摘要

目的 探讨p53对金属蛋白酶组织抑制因子2(tissue inhibitor of metalloproteinases 2, TIMP2)的转录调控作用及其对结直肠癌细胞生物学功能的作用。方法 采用p53缺失HCT116细胞转录组数据筛选差异表达基因;选取HCT116与HCT8两类结直肠癌细胞株,在p53敲降及激活条件下利用q RT-PCR与蛋白质印迹测定p53对TIMP2的转录调控效应;结合JASPAR数据库与双荧光素酶报告实验,验证p53直接转录调控TIMP2;利用划痕和Transwell实验检测p53过表达与TIMP2缺失对肿瘤细胞迁移和侵袭的作用;利用TCGA数据库分析结直肠癌(TCGA-COAD)中癌与癌旁组织中TIMP2的表达并进行生存情况分析。结果 RNA-seq分析显示TIMP2为差异表达较显著的基因之一;在HCT116与HCT8细胞中TIMP2 m RNA和蛋白质水平均与p53呈正相关; p53可直接转录激活TIMP2,进而抑制肿瘤的恶性表型。TCGA数据库显示COAD肿瘤中TIMP2低表达,且与结直肠癌患者预后较差相关。结论 TIMP2在结直肠癌细胞中低表达, p53部分通过转录调控TIMP2抑制肿瘤细胞转移,表明TIMP2有望成为未来治疗结直肠癌的潜在靶点之一。

关键词

p53 / 金属蛋白酶组织抑制因子2 / 结直肠癌 / 转录调控 / 侵袭