GPER通过阻断氧化应激-炎症恶性循环改善内毒素诱导肝细胞损伤的机制研究

摘要

目的 探讨G蛋白偶联雌激素受体(G protein-coupled estrogen receptor, GPER)在内毒素诱导肝细胞损伤中的保护作用及其分子机制,并评估其作为性别差异化治疗策略的潜力。方法 采用脂多糖(li-popolysaccharide, LPS)诱导的AML-12小鼠肝细胞模型模拟脓毒性肝损伤的早期病理过程,设空白对照组、 LPS组、 LPS+G1 (GPER激动剂)组和LPS+G15 (GPER拮抗剂)组。通过流式细胞术、蛋白质印迹、 RT-q PCR、 ELISA、透射电镜等技术检测细胞凋亡率、 GPER表达、线粒体活性氧(mitochondrial reac-tive oxygen species, mt ROS)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、 NLRP3炎症小体活化、炎症因子(白细胞介素1β, IL-1β)、 ATP/AMP比值、线粒体膜电位(ΔΨm)及超微结构的变化。结果 与LPS组相比, G1处理可显著降低细胞凋亡率,抑制mt ROS和MDA生成,下调NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号通路活化,提高ATP水平和降低AMP/ATP比值,并改善线粒体膜电位与超微结构;而G15则加重上述损伤。相关性分析显示, GPER表达与细胞凋亡率呈负相关(R2=0.8970), mt ROS水平与凋亡率及IL-1β含量均呈正相关。结论 GPER通过抑制mt ROS生成,阻断NLRP3炎症体活化及下游炎症反应,改善线粒体能量代谢和结构完整性,从而减轻脓毒症肝细胞损伤,其作用机制为临床性别差异化治疗提供了新靶点与理论依据。

关键词

脓毒症肝损伤 / G蛋白偶联雌激素受体 / 氧化应激 / NLRP3炎症小体 / 线粒体功能障碍 / 性别差异