MMP2调节高级别浆液性卵巢癌细胞对PARP抑制剂Olaparib敏感性的机制研究

摘要

目的 探讨基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP2)对高级别浆液性卵巢癌(high-grade serous ovarian cancer, HGSOC)细胞聚-ADP核糖聚合酶抑制剂(poly-ADP ribose polymerase inhibitor, PARPi)敏感性的影响及机制。方法 培养HGSOC细胞株HeyA8,分为对照组、sh-NC组、sh-MMP2组，RT-qPCR和蛋白质印迹检测MMP2表达，CCK-8法检测不同浓度奥拉帕尼(olaparib)处理下细胞存活率。再将HeyA8细胞分为sh-NC组、sh-MMP2组、sh-NC+PARPi组、sh-MMP2+PARPi组，细胞划痕实验、Annexin V-FITC/PI法、Hochest 33258染色分别检测细胞迁移与凋亡，蛋白质印迹测定血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)/磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase, PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路相关蛋白表达。结果 与对照组、sh-NC组比较，sh-MMP2组HeyA8细胞中MMP2 mRNA及蛋白相对表达量下调，Olaparib处理后的细胞存活率降低(P<0.05)。与sh-NC组比较，sh-MMP2组细胞划痕愈合率降低，凋亡率增加，可见核浓缩、碎裂的凋亡形态，血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、血管内皮细胞生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)、磷酸化PI3K(Tyr458)[p-PI3K(Tyr458)]、磷酸化Akt(Ser473)[p-Akt(Ser473)]蛋白相对表达水平均下调(P<0.05);与sh-NC+PARPi组比较，sh-MMP2+PARPi组细胞划痕愈合率降低，凋亡率增加，核浓缩、碎裂的凋亡细胞更多，VEGFA、VEGFR2、p-PI3K(Tyr458)、p-Akt(Ser473)蛋白相对表达水平也均下调(P<0.05)。结论 沉默MMP2表达能够促进PARPi诱导的HGSOC细胞凋亡，增加PARPi敏感性。

关键词

高级别浆液性卵巢癌 / 基质金属蛋白酶2 / 奥拉帕尼 / 药物敏感性 / 血管内皮生长因子/磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B通路