刺鼠信号蛋白通过PPARγ途径促进高糖环境下滋养层细胞的增殖、侵袭和成管能力

摘要

目的 探索刺鼠信号蛋白(agouti signaling protein, ASIP)在不同糖耐量孕妇胎盘中的表达及在高糖环境下对滋养层细胞增殖、侵袭和成管能力的影响。方法 纳入妊娠期糖尿病(gestational diabetesmellitus, GDM)孕妇和非GDM孕妇各20例。应用免疫组织化学和免疫荧光染色检测胎盘组织中ASIP的表达和定位。采用高糖培养的人滋养层细胞系HTR-8/SVneo细胞模型,分别给予重组人ASIP蛋白与过氧化物酶体增殖物激活受体γ (peroxisome proliferator-activated receptor γ, PPARγ)的拮抗剂GW9662处理,通过MTT、 Transwell及Matrigel实验评估细胞增殖、侵袭与成管能力。采用蛋白质印迹和RT-q PCR分析相关蛋白及m RNA表达。结果 GDM组胎盘重量较非GDM组明显增加(570 gvs490 g,P=0.019)。RT-q PCR和蛋白质印迹结果表明GDM胎盘中ASIP的m RNA及蛋白表达明显升高,免疫组织化学和免疫荧光染色检测进一步证实在胎盘绒毛滋养层细胞中ASIP蛋白表达明显升高。在高糖环境下, HTR-8/SVneo细胞中ASIP的m RNA及蛋白水平的表达明显增加,重组人ASIP蛋白(50～200 ng/m L)以剂量依赖性的方式促进HTR-8/SVneo细胞增殖,诱导PPARγ、信号转导与转录激活因子1 (signal transducer and activator oftranscription 1, STAT1)和STAT3的磷酸化。ASIP (200 ng/m L)作用HTR-8/SVneo细胞24 h后,细胞的增殖、侵袭和成管能力均显著增强,加入PPARγ拮抗剂GW9662 (20μmol/L)后上述效应可被部分逆转(P_均<0.01)。结论 GDM/高糖环境下胎盘滋养层细胞中ASIP表达升高, ASIP通过PPARγ依赖性机制促进高糖环境下滋养层细胞的过度增殖、侵袭及成管,从而参与GDM病理性胎盘重塑。

关键词

刺鼠信号蛋白 / 滋养层细胞 / 胎盘 / 妊娠期糖尿病 / 过氧化物酶体增殖物激活受体γ