RAGE抑制剂TTP488降低糖尿病性视网膜病变小鼠模型中的视网膜炎症的疗效

摘要

目的 深入探索晚期糖基化终末产物受体抑制剂TTP488降低视网膜炎症的疗效及其作用机制。方法 30只雄性C57BL/6J小鼠随机分入3组(n=10):对照组、 1型糖尿病(type I diabetes mellitus,T1DM)模型组和T1DM+TTP488组。建立链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)诱导的T1DM小鼠模型。免疫荧光染色测定小鼠视网膜组织中小胶质细胞标记物(Iba1)阳性细胞活化程度; ELISA测定其中炎症因子TNF-α、 IL-1β、 IL-6的水平。体外细胞实验分组为细胞对照组、 LPS组、 LPS+TTP488组、 LPS+sh R-NA-P65组和LPS+sh RNA-NT组。采用脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导建立小鼠视网膜色素上皮原代细胞炎症模型。腺病毒载体介导敲低P65。RT-q PCR法测定细胞内VEGF-Dm RNA的表达水平。蛋白质印迹法测定视网膜组织中和体外细胞内磷酸化NF-κB P65 (p-P65)/P65和VEGF-D的表达水平。结果 与T1DM模型组比较, T1DM+TTP488组小鼠视网膜组织中Iba1阳性细胞数量、细胞分支数和细胞分支连接点数(每视野个数)均减少(P<0.05); TNF-α、 IL-1β、 IL-6水平均降低(P<0.05); p-P65/P65和VEGF-D相对表达水平均降低(P<0.05)。与LPS组比较, LPS+TTP488组和LPS+sh RNA-P65组VEGF-D m RNA相对表达水平均降低(P<0.05); p-P65和VEGF-D相对表达水平均下调(P<0.05)。结论 TTP488通过抑制NF-κB的活化下调VEGF-D的表达,可降低糖尿病性视网膜病变小鼠模型中的视网膜炎症和组织结构病变。

关键词

糖尿病性视网膜病变 / 炎症 / 晚期糖基化终末产物 / 晚期糖基化终末产物受体 / TTP488 / 血管内皮生长因子