lncRNA SNHG14靶向miR-181a-5p/PRDX3轴对IL-1β诱导的软骨细胞损伤的影响

摘要

目的 探讨长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因14(long non-coding rna small nucleolar RNA host gene 14,lncRNA SNHG14)靶向微小RNA-181a-5p(microRNA-181a-5p, miR-181a-5p)/过氧化物还原酶3(peroxiredoxin 3,PRDX3)轴对白细胞介素(interleukin, IL)-1β诱导的软骨细胞损伤的影响。方法 双荧光素酶实验检测lncRNA SNHG14、miR-181a-5p和PRDX3靶向关系。人软骨细胞C28/I2分为以下10组：NC组、IL-1β组、sh-NC组、sh-SNHG14组、sh-SNHG14+anti-NC组、sh-SNHG14+anti-miR-181a-5p组、miR-NC组、miR-181a-5p mimic组、miR-181a-5p mimic+pcDNA-NC组、miR-181a-5p mimic+pcDNA-PRDX3组。克隆形成实验、流式细胞术分别检测细胞增殖和凋亡情况；酶联吸附免疫法检测IL-6、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha, TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein 1,MCP-1)水平；Griess试剂法检测一氧化氮(nitric oxide, NO)水平；蛋白质印迹检测PRDX3、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、细胞周期蛋白(Cyclin D1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、Bcl-2家族相关X蛋白(Bcl2-associated X protein, Bax)蛋白表达量。结果 双荧光素酶实验结果显示miR-181a-5p与lncRNA SNHG14、PRDX3均存在靶向关系(P<0.05)。与NC组比较，IL-1β组细胞凋亡率，IL-6,TNF-α,MCP-1,NO水平，lncRNA SNHG14表达量，PRDX3,Bax蛋白表达量明显上升，miR-181a-5p表达量，集落形成数量，PCNA、Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达水平明显下降(P<0.05);与sh-NC组或miR-NC组相比，sh-SNHG14组或miR-181a-5p mimic组细胞中miR-181a-5p表达量，集落形成数量，PCNA、Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达水平明显升高，细胞凋亡率，IL-6、TNF-α、MCP-1、NO水平，lncRNA SNHG14表达量，PRDX3和Bax蛋白表达量明显降低(P<0.05);与sh-SNHG14+anti-NC组比较，sh-SNHG14+anti-miR-181a-5p组细胞中各项检测指标变化趋势与之相反(P<0.05);而miR-181a-5p mimic+pcDNA-PRDX3组细胞的各指标趋势均与miR-181a-5p mimic+pcDNA-NC组相反(P<0.05)。结论 lncRNA SNHG14通过靶向miR-181a-5p/PRDX3轴缓解IL-1β诱导的软骨细胞损伤。

关键词

小核仁RNA宿主基因14 / 微小RNA-181a-5p / 过氧化物还原酶3 / 骨关节炎