基于NLRP3/ASC/Caspase-1通路探讨SOCS-1对肺炎克雷伯菌感染的A549细胞的影响

摘要

目的 基于NOD样受体家族热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)/凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)/胱天蛋白酶-1(caspase-1)通路探讨细胞因子信号抑制物1(suppressor of cytokine signaling 1,SOCS-1)对肺炎克雷伯菌感染的A549细胞的影响。方法 人Ⅱ型肺泡上皮细胞(A549细胞)被分为4个实验组：siRNA NC组、siRNA SOCS-1组、pcDNA3.1 NC组、pcDNA3.1 SOCS-1组。经肺炎克雷伯菌感染3 h后使用siRNA NC(50 nmol/L)、siRNA SOCS-1(50 nmol/L)、pcDNA3.1 NC(20 nmol/L)、pcDNA3.1 SOCS-1(20 nmol/L)处理相应的A549细胞48 h。MTT实验及BrdU染色实验分析A549细胞的增殖活性；流式细胞术分析A549细胞的凋亡率；ELISA测定各组A549细胞培养基中炎症因子水平；蛋白质印迹实验检测A549细胞中SOCS-1、NLRP3、ASC、caspase-1蛋白的表达水平。结果 感染肺炎克雷伯菌能够导致A549细胞中的SOCS-1表达水平增加。与siRNA NC组比较，siRNA SOCS-1组的A549细胞增殖活性增加，凋亡率及炎症因子水平降低，NLRP3、ASC、caspase-1表达水平降低。与pcDNA3.1 NC组比较，pcDNA3.1 SOCS-1组的A549细胞增殖活性降低，凋亡率、炎症因子水平增加，NLRP3、ASC、Caspase-1表达水平增加。结论 SOCS-1能够促进肺炎克雷伯菌感染的A549细胞的凋亡及炎症因子释放水平，并抑制A549细胞增殖，这一过程与SOCS-1调控NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路密切相关。

关键词

细胞因子信号抑制物1 / 肺炎克雷伯菌 / NOD样受体蛋白3 / 凋亡相关斑点样蛋白 / 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1

基金资助

河北省医学科学研究课题计划资助(No.20261277)