miR-133a-3p靶向TGIF2调节急性髓系白血病细胞系OCI-AML3细胞凋亡与线粒体功能

摘要

目的 分析miR-133a-3p及其潜在靶点转化生长因子-β诱导因子2(transcription growth factor-β-induced factor 2,TGIF2)在急性髓系白血病细胞系OCI-AML3细胞增殖、凋亡及线粒体功能中的作用机制。方法 OCI-AML3细胞分别或共转染miR-133a-3p mimic和pcDNA-TGIF2。RT-qPCR检测转染效率；生物信息学软件预测miR-133a-3p和TGIF2靶向位点；利用双荧光素酶报告系统确认二者靶向关系；CCK-8实验和EdU染色检测细胞增殖；流式细胞术分析细胞凋亡水平与线粒体膜电位；试剂盒检测ROS含量；蛋白质印迹检测Caspase-3、Caspase-9、TGIF2、Bcl-2、Bax及c-Myc蛋白的表达。结果 在OCI-AML3细胞中，miR-133a-3p与TGIF2的表达呈负相关，miR-133a-3p靶向结合TGIF2。与对照组比较，TGIF2组的细胞活力显著升高(P<0.05);EdU阳性细胞明显增多；细胞凋亡率显著降低(P<0.05);Bax/Bcl-2、Caspase-3及Caspase-9表达显著下调(P<0.05),而c-Myc表达显著上调(P<0.05);线粒体膜电位无明显变化；ROS含量显著降低(P<0.05)。miR-133a-3p过表达逆转了上述结果。与TGIF2组比较，mimic+TGIF2组的细胞活力显著降低(P<0.05);EdU阳性细胞明显减少；细胞凋亡率显著升高(P<0.05);Bax/Bcl-2、Caspase-3及Caspase-9表达显著上调(P<0.05),而c-Myc表达显著下调(P<0.05);线粒体膜电位明显改变；ROS含量显著升高(P<0.05)。结论 miR-133a-3p通过靶向TGIF2抑制OCI-AML3细胞活力及增殖，上调ROS水平，诱导线粒体膜电位去极化，促进细胞凋亡。

关键词

miR-133a-3p / 转化生长因子-β诱导因子2 / 急性髓系白血病 / 细胞凋亡 / 活性氧

基金资助

河北省医学科学研究课题(No.20242351)