Sat1在顺铂诱导HEI-OC1细胞氧化应激中的作用及机制

摘要

目的 探讨精胺/亚精胺N1-乙酰转移酶1 (spermidine/spermine N1-acetyltransferase 1,Sat1)在顺铂（cisplatin,DDP）诱导小鼠耳蜗来源的永生化听觉上皮细胞（HEI-OC1）损伤中的作用及机制。方法 将HEI-OC1细胞分为siNC、siSat1、siNC+DDP和siSat1+DDP四组。采用CCK-8法检测细胞增殖活力；通过DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平；采用qPCR检测Sat1、过氧化氢酶（catalase,CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶1 (glutathione peroxidase 1,GPx1)的mRNA表达水平；采用蛋白质印迹检测Sat1及凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2 (B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bcl2-associated X protein,Bax）、半胱天冬氨酸蛋白酶-3 (cysteinyl aspartate-specific proteinase-3,Caspase-3)、cleaved Caspase-3的蛋白表达水平，并计算cleaved Caspase-3/Caspase-3比值与Bcl-2/Bax比值。采用ELISA法检测丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性以评估氧化应激程度。结果 与siNC组相比，siSat1组Sat1 mRNA和蛋白质表达下调，基础状态下ROS和MDA降低，SOD活性和CAT、GPx1 mRNA升高，Bax和cleaved Caspase-3蛋白表达减少（P均<0.05）。DDP处理后，siNC+DDP组细胞活力下降，ROS和MDA升高，SOD活性及CAT、GPx1 mRNA降低，Bax和Cleaved Caspase-3蛋白表达升高；siSat1+DDP组上述指标均显著改善（P均<0.05）。结论 Sat1通过介导氧化应激反应，在DDP诱导的HEI-OC1细胞凋亡中发挥关键作用。

关键词

精胺/亚精胺N1-乙酰转移酶1 / 顺铂 / 氧化应激 / 细胞凋亡

基金资助

新疆维吾尔自治区人民医院院内项目（No.20240201）; “天山英才”医药卫生高层次人才培养计划（No.TSYC202301B030）; 新疆第二医学院2025年校级科研基金项目（No.ZR202553）