FANCL新突变（c.1033G>A）致早发性卵巢功能不全1例报道及体外功能验证

摘要

目的 探究一例早发性卵巢功能不全（premature ovarian insufficiency,POI）患者中发现的FANCL新突变的特点，并在体外研究其对功能的影响。方法 利用全外显子组测序（whole-exome sequencing,WES）技术，在一例POI患者中筛选到了新的FANCL杂合突变c.1033G>A(p.Glu345Lys)，家系回访发现该突变遗传自早绝经的母亲。通过sanger测序鉴定该突变真实性，并通过软件预测突变位点的保守性。构建过表达FANCL突变型和野生型质粒，瞬时转染进HEK293T细胞株，通过qPCR、免疫荧光和Western blot来检测突变产生的影响。结果 该突变位于FANCL的环状结构域内且在多物种中高度保守。突变体mRNA表达水平没有明显变化，而蛋白质表达水平显著下调。体外细胞实验进一步揭示该变异会通过降低蛋白质稳定性导致表达水平下降。结论 该POI患者存在FANCL c.1033G>A变异，并引起蛋白质稳定性下降而导致患者患病。

关键词

早发性卵巢功能不全(POI) / FANCL / 全外显子组测序(WES) / 错义突变 / 蛋白质稳定性