脲对Flt3配体包涵体蛋白质体外复性与同时纯化的作用研究

余秀娟; 张如月; 卢金铭

河北北方学院学报（自然科学版） ›› 2017, Vol. 33 ›› Issue (12) : 8 -10+12.

余秀娟, 张如月, 卢金铭

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摘要

目的研究小分子脲对包涵体蛋白质体外复性与同时纯化的作用。方法考察在高效疏水相互作用色谱（HPHIC）流动相中添加脲时,不同浓度的小分子脲对包涵体蛋白重组人酪氨酸激酶配体（recombined human Flt3ligand,rhFL）复性效率的影响,并采用荧光光谱技术,进一步研究目标蛋白Flt3复性前后复性效果变化与荧光强度变化的规律。结果当脲的添加浓度为3mol·L^-1时,rhFL的质量回收率达到33.1%,更易于恢复其天然构象及生物活性。结论添加适当浓度的脲可促进rhFL的复性与同时纯化,通过荧光光谱技术可以初步推测包涵体蛋白在复性过程中生物活性的变化,为rhFL蛋白药物的研发提供参考。